Phospho-Src-Y529 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P12931

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Src-Funktion und Lokalisation

• Proto-Onkogen Tyrosin-Protein-Kinase Src (c-Src) ist eine nicht-rezeptorische Tyrosinkinase von ~60 kDa, kodiert vom SRC-Gen (Gen-ID: 6714). Alternative Bezeichnungen sind ASV, SRC1, THC6 und p60-Src. Durch alternatives Spleißen entstehen drei Isoformen, wobei Isoform 1 die kanonische Sequenz darstellt.
• Src vermittelt die Signaltransduktion von verschiedenen Rezeptortypen (Immun-, Integrin-, Wachstumsfaktor-, GPCR-Rezeptoren) und steuert Gentranskription, Immunantwort, Zelladhäsion, Zellzyklusprogression, Apoptose, Migration und Transformation (PubMed:34234773, PubMed:21411625). Verwandte Referenzen: PMID:34234773, PMID:21411625
• Durch Phosphorylierung von Substraten wie AFAP1, Cortactin (CTTN), FAK (PTK2) und Paxillin orchestriert Src die zytoskelettale Reorganisation, Fokaladhäsionsdynamik und Zell-Zell-Kontakt-Signalübertragung.
• Src lokalisiert an Zellmembran, mitochondriale Innenmembran, Zellkern, Zytoplasma, Zytoskelett und Zellkontakte, was räumlich begrenzte Signalübertragung ermöglicht.
• Der Antikörper erkennt spezifisch Src, phosphoryliert an Tyr529 – einer konservierten Reststelle im C-terminalen Schwanz, deren Phosphorylierung durch die Csk-Kinase die autoinhibierte geschlossene Konformation aufrechterhält. Dephosphorylierung oder Verdrängung der pTyr529-SH2-Wechselwirkung bereitet Src auf die Aktivierung vor.
• Src-Expression ist ubiquitäre; allerdings weisen Blutplättchen, Neuronen und Osteoklasten 5–200-fach höhere Spiegel auf als die meisten anderen Gewebe. Expression wurde auch in Haut nachgewiesen (PubMed:22294297). Verwandte Referenzen: PMID:22294297
• In Osteoklasten ist Src essenziell für die Knochenresorption, wirkt über einen PTK2B/PYK2-Komplex und phosphoryliert CBL zur Aktivierung des PI3K-Signalwegs (PubMed:14585963, PubMed:8755529). Es fördert zudem die Energieproduktion durch Aktivierung der Cytochrom-c-Oxidase (PubMed:12615910). Verwandte Referenzen: PMID:14585963, PMID:8755529, PMID:12615910
• Src beteiligt sich an der antiviralen angeborenen Immunität durch Verstärkung der RIG-I-vermittelten Signalübertragung (PubMed:19419966) und vermittelt die IL6-getriebene Epithelregeneration über den YAP1-NOTCH-Signalweg (PubMed:25731159). Verwandte Referenzen: PMID:19419966, PMID:25731159

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das der Y529-Region entspricht; stellen Sie sicher, dass die Probenvorbereitung die Phosphorylierung erhält (verwenden Sie Phosphataseinhibitoren) und fügen Sie nicht-phosphorylierte Kontrollen zur Spezifitätsüberprüfung hinzu.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von Src ~60 kDa; eine Bande dieser Größe sollte beobachtet werden. Erwägen Sie die Verwendung von 5 % BSA-Blocking, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Bei IHC-P und IF/ICC können Antigen-Retrieval-Methoden die Erhaltung von Phospho-Epitopen beeinflussen; schonende citratbasierte Extraktion und Verarbeitung bei niedriger Temperatur werden empfohlen.
• Der ELISA-Nachweis von Phospho-Src-Y529 kann in Kombination mit Gesamt-Src-Antikörpern verwendet werden, um ortsspezifische Phosphorylierungslevel in Zelllysaten zu bestimmen.
• Kreuzreaktivität mit Src von Maus und Ratte ist aufgrund der Sequenzhomologie zu erwarten; validieren Sie im entsprechenden Probensystem.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet eine One-Stop-Beschaffungsplattform für IVD-Rohstoffe, einschließlich validierter phosphospezifischer Antikörper wie dieses Anti-Phospho-Src-Y529 pAb. Für Diagnostikentwickler und Forscher der Kinase-Signalübertragung bietet CamelBio zudem passende Antikörperpaare, Bulk-Hilfsreagenzien und kundenspezifische Beschaffung seltener Targets. Von der Idee bis zur Klinik unterstützt CamelBio Hersteller mit integrierter Rohstoffversorgung, technischen Dienstleistungen und Beratung – und vereinfacht so die Beschaffung für Signaltransduktionsforschung und darüber hinaus.