Phospho-Smad5-S465 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q99717

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Smad5-Funktion und Lokalisierung

• SMAD5 (Mothers against decapentaplegic homolog 5, auch bekannt als JV5-1, MADH5) ist ein Mitglied der SMAD-Familie von Transkriptionsregulatoren.
• Nach BMP-Ligandenstimulation wird SMAD5 an Ser465 durch aktivierte Typ-I-BMP-Rezeptoren phosphoryliert, was die Komplexbildung mit SMAD4 und den Kerntransport zur Regulierung der Transkription ermöglicht.
  Verwandte Referenzen: PMID:9442019
• Der aktivierte SMAD-Komplex bindet Smad-Bindungselemente (SBEs) in den Promotoren von Zielgenen, um das Ergebnis des Signalnetzwerks zu modulieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:33510867
• SMAD5 spielt eine entscheidende Rolle bei der Embryonalentwicklung, Zellendifferenzierung, Angiogenese und Gewebehomöostase.
  Verwandte Referenzen: PMID:12064918 PMID:16516194
• Nicht-phosphoryliertes SMAD5 hat eine zytoplasmatische und mitochondriale Rolle im Energiestoffwechsel, indem es die mitochondriale Atmung und Glykolyse über die Interaktion mit Hexokinase 1 fördert.
  Verwandte Referenzen: PMID:28675158
• SMAD5 ist ubiquitär exprimiert und lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern und Mitochondrium.
• Das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, und enthält eine Zink-bindende Domäne, die für die DNA-Interaktion essentiell ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid hergestellt, das den Regionen um Ser465 von humanem Smad5 entspricht, um eine spezifische Detektion der phosphorylierten Form zu gewährleisten.
• Für Western Blotting verwenden Sie Standardprotokolle mit PVDF- oder Nitrocellulosemembranen; ziehen Sie die Zugabe von Phosphataseinhibitoren in Lysepuffer in Betracht, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten.
• In ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen für das spezifische Assay-Format.
• Eine Kreuzreaktivität mit humanem, murinem und Ratten-Smad5 wurde berichtet; validieren Sie dies in der relevanten Spezies und Probenart vor der experimentellen Verwendung.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von Smad5 beträgt etwa 52 kDa; ein Band dieser Größe bestätigt die Spezifität.

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