Phospho-Smad2-T220 Kaninchen-pAb - Q15796

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: SMAD2-Funktion und Lokalisation

• SMAD2 (Mothers against decapentaplegic homolog 2), auch bekannt als JV18-1, MADH2 oder hMAD-2, ist ein rezeptorgeregeltes SMAD-Protein (R-SMAD), das als intrazellulärer Signalwandler für TGF-beta- und Activin-Signalwege fungiert.
• Nach der Ligandenbindung wird SMAD2 durch Typ-1-Rezeptorkinasen phosphoryliert, bildet einen Komplex mit SMAD4 und wandert in den Zellkern, wo es an das TRE-Element bindet, um die Transkription von Zielgenen zu regulieren.
• SMAD2 reguliert die PDPK1-Kinaseaktivität positiv, indem es deren Dissoziation vom inhibitorischen 14-3-3-Protein YWHAQ fördert.
• SMAD2 könnte als Tumorsuppressor bei kolorektalen Karzinomen fungieren, wie Studien zeigen, die seine Beteiligung an der Wachstumshemmung belegen. Zugehörige Referenzen: PMID:8752209
• SMAD2 pendelt als Reaktion auf die Signalaktivierung zwischen Zytoplasma und Zellkern.
• Die höchsten Expressionsniveaus werden in der Skelettmuskulatur, den Endothelzellen, dem Herzen und der Plazenta beobachtet.
• SMAD2 unterliegt zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität feinjustieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Thr220; daher erkennt dieser Antikörper spezifisch SMAD2, das an diesem Rest phosphoryliert ist.
• Für Western Blotting wird eine Bande bei etwa 52 kDa erwartet. Verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren während der Zelllyse, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Erwägen Sie die Verwendung einer TGF-beta-Stimulation, um die SMAD2-Phosphorylierung als Positivkontrolle in Ihrem experimentellen System zu induzieren.
• Optimieren Sie für IHC-P die Bedingungen der Antigen-Retrieval-Methoden und schließen Sie geeignete Kontrollen für die Stabilität des Phospho-Epitops ein.
• Kreuzreaktivität mit Proben von Mensch, Maus und Ratte wurde berichtet; validieren Sie diese in Ihrem spezifischen Gewebe oder Ihrer Zelllinie.

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