Phospho-Rpb1 CTD-T4 Kaninchen mAb für WB, ELISA - P24928

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der DNA-gesteuerten RNA-Polymerase II-Untereinheit RPB1

• Die DNA-gesteuerte RNA-Polymerase II-Untereinheit RPB1 ist der katalytische Kern der Pol II, verantwortlich für die Synthese von mRNA-Vorläufern und nicht-codierenden RNAs in einem Transkriptionszyklus, der Initiation, Elongation und Termination umfasst. Verwandte Referenzen: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474
• RPB1 bildet das aktive Zentrum mit der Untereinheit RPB2, katalysiert die Nukleotidzugabe über ein Mg²⁺-koordiniertes DxDGD-Motiv und korrigiert falsch eingebaute Nukleotide durch 3′→5′-Exonukleaseaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:8381534, PMID:9852112, PMID:30190596
• Die einzigartige C-terminale Domäne (CTD) von RPB1, die aus 52 Heptapeptid-Wiederholungen besteht, dient als dynamische Plattform für transkriptionsgekoppelte Prozesse; Phosphorylierung an Ser5 fördert das Promotor-Escape, während Ser2-Phosphorylierung entscheidend für die Elongation und die prä-mRNA-Prozessierung ist. Acetylierung und Methylierung von CTD-Lysinen passen die Genexpression zusätzlich fein an. Verwandte Referenzen: PMID:24207025, PMID:26124092
• Über die DNA-abhängige Transkription hinaus verfügt RPB1 über eine RNA-abhängige RNA-Polymeraseaktivität, die nicht-codierende RNAs verlängert und als Replikase/Transkriptase für das Hepatitis-Delta-Virus wirken kann.
• RPB1 ist hauptsächlich im Zellkern und auf Chromosomen lokalisiert, kann aber auch im Zytoplasma gefunden werden.
• Posttranslationale Modifikationen von RPB1 umfassen Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung, Ubiquitinierung und ISGylierung, die seine Aktivität und Interaktionen regulieren.
• Mutationen in POLR2A sind mit neuroentwicklungsbedingten Störungen einschließlich geistiger Behinderung (NEDHIB) verbunden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Verwenden Sie bei der Durchführung von Western Blotting Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern, um die T4-Phosphorylierung zu erhalten, und nutzen Sie einen Gradienten- oder hochprozentigen Trenngel, um die 217-kDa-Bande klar zu trennen.
• Für die ELISA sollten Sie eine Beschichtung mit einem phosphorylierten Peptid oder phosphoangereicherten Proteinroextrakten in Betracht ziehen, um die Spezifität für das modifizierte Epitop zu bestätigen.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Mensch, Maus und Ratte deutet auf ein konserviertes T4-Motiv hin; validieren Sie in der für Ihr Experimentalsystem relevanten Spezies und Probenart.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet ein umfassendes Portfolio an IVD-Rohmaterialien für die Transkriptions- und Chromatinforschung, einschließlich validierter Antikörperpaare, optimierter monoklonaler und polyklonaler Antikörper gegen RNA-Polymerase-II-Modifikationen sowie bulk-Hilfsreagenzien. Für spezielle Anforderungen wie seltene phosphospezifische Ziele oder individuelles Immunogen-Design können unsere Beschaffungsdienste Ihnen helfen, effizient die richtigen Materialien zu erhalten.