Phospho-RB-S608 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - P06400

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RB1

• RB1 (Retinoblastom-assoziiertes Protein) ist ein Tumorsuppressor, der den Zellzyklusverlauf durch Regulation des G1/S-Übergangs kontrolliert, hauptsächlich durch seine Interaktion mit E2F-Transkriptionsfaktoren. Zugehörige Referenzen: PMID:10499802
• Die hypophosphorylierte Form von RB1 bindet und hemmt E2Fs, während die CDK-vermittelte Phosphorylierung (z. B. an Ser608) diese Interaktion stört, was E2F-abhängige Transkription und den Eintritt in die S-Phase ermöglicht. Zugehörige Referenzen: PMID:10499802
• RB1 fördert außerdem den G0-G1-Übergang durch Phosphorylierung durch CDK3/Cyclin-C. Zugehörige Referenzen: PMID:15084261
• RB1 rekrutiert Histonmethyltransferasen und erhält die Heterochromatinstruktur aufrecht, insbesondere die H4K20-Trimethylierung, und vermittelt die transkriptionelle Repression durch HDAC-Rekrutierung.
• RB1 wird in der Netzhaut und in Vorhautkeratinozyten exprimiert (auf Proteinebene), mit subzellulärer Lokalisation sowohl im Kern als auch im Zytoplasma. Zugehörige Referenzen: PMID:20940255
• Virale Onkoproteine wie das SV40 große T-Antigen, HPV E7 und Adenovirus E1A binden an RB1, stören RB1-E2F-Komplexe und tragen zur zellulären Transformation bei.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das Ser608 von humanem RB1 entspricht; für eine optimale Detektion sollten Sie Proteinlysate aus Zelllinien mit bekannter RB1-Expression und Phosphorylierungsstatus verwenden.
• Phosphorylierte Proteine sind instabil; fügen Sie Phosphataseinhibitoren zu Lyse- und Assaypuffern hinzu, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Für das Western Blotting wird eine Reduktionsschritt mit DTT oder β-Mercaptoethanol empfohlen; validieren Sie den Antikörper im entsprechenden Probensystem, da eine Kreuzreaktivität mit nicht-phosphoryliertem RB1 auftreten kann.
• Für ELISA können direkte oder Sandwich-Formate optimiert werden; kombinieren Sie ihn mit einem Gesamt-RB1-Antikörper, um die Phosphorylierungssignale zu normieren.

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