Phospho-Raptor-Ser792 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8N122

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des regulatorisch assoziierten Proteins von mTOR

• RPTOR ist eine Schlüsselkomponente des mechanistischen Target of Rapamycin-Komplex 1 (mTORC1), der als zentraler Nährstoffsensor fungiert und anabole Reaktionen sowie Zellwachstum stimuliert. Verwandte Referenzen: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• Als Reaktion auf Nährstoffe und Wachstumsfaktoren wird mTORC1 zur Lysosomenmembran rekrutiert, wobei RPTOR diese Rekrutierung über die Interaktion mit Rag-GTPasen vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:12747827 PMID:24403073 PMID:26588989
• RPTOR fördert die Substratspezifität, indem es an Proteine mit TOS-Motiv bindet und sie zur Phosphorylierung an die Kinasedomäne von MTOR leitet – darunter die wichtigen nachgeschalteten Effektoren RPS6KB1 und EIF4EBP1. Verwandte Referenzen: PMID:12747827
• mTORC1 hemmt zudem katabole Stoffwechselwege durch Phosphorylierung der Autophagie-Initiationskomponenten ULK1 und ATG13 sowie des Transkriptionsfaktors TFEB. Verwandte Referenzen: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• Das Protein lokalisiert an der Lysosomenmembran, im Zytoplasma und in zytoplasmatischen Granula, was mit seiner dynamischen Rolle bei der Nährstoffsensorik übereinstimmt.
• RPTOR ist ein Phosphoprotein (wie in seiner Stichwortannotation angegeben), das regulativen posttranslationalen Modifikationen unterliegt; Acetylierung und Ubiquitinierung wurden ebenfalls beobachtet.
• Hohe Expression in Skelettmuskel, geringere Expression in Gehirn, Lunge, Dünndarm, Niere und Plazenta; breite Expression across Gewebe mit den höchsten Werten in Nasenschleimhaut und Hypophyse.
• Genaliase sind KOG1 und Mip1; das Protein wird auch als p150 Scaffold-Protein für das Target of Rapamycin (TOR) bezeichnet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der phosphorylierten Ser792-Stelle entspricht; für die Western Blot verwenden Sie humane Zelllinien wie HeLa oder HEK293, die bekanntermaßen RPTOR exprimieren.
• Validieren Sie die Phosphospezifität, indem Sie Zelllysate mit Lambda-Phosphatase behandeln, um den Signalverlust zu bestätigen, oder durch Verwendung nicht-phosphorylierter Peptid-Konkurrenz im ELISA.
• Für das ELISA erwägen Sie die Beschichtung mit dem phosphorylierten Peptid und die Detektion mit dem Antikörper; optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und die Blockierungsbedingungen.
• RPTOR ist ein großes Protein (~149 kDa); sorgen Sie für einen ausreichenden Proteintransfer und verwenden Sie für die Western Blot eine passende Gelkonzentration (z. B. 6-8 % SDS-PAGE).

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