Phospho-Rac1/2/3-S71 Kaninchen-pAb für WB, ELISA - P63000/P15153/P60763

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Rac1/2/3 Funktion und Lokalisierung

• Rac1 ist eine kleine, mit der Plasmamembran assoziierte GTPase, die zwischen einem aktiven GTP-gebundenen und einem inaktiven GDP-gebundenen Zustand zyklisiert und so diverse zelluläre Prozesse reguliert, einschließlich sekretorischer Trafficking, Phagozytose apoptotischer Zellen, Polarisierung von Epithelzellen und wachstumsfaktorinduzierter Membranraffung.
  Verwandte Referenzen: PMID:1643658 | PMID:22843693 | PMID:23512198
• Stimuliert die PKN2-Kinaseaktivität und trägt zu downstream-Signalkaskaden bei.
  Verwandte Referenzen: PMID:9121475
• Erforderlich für die Translokation von DSG3 zu Zell-Zell-Kontakten und die Organisation kortikaler F‑Aktin-Bündel, wodurch das Aktin-Zytoskelett an Zellkontakten verankert wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:22796473
• Fungiert als Untereinheit des Phagozyten-NADPH-Oxidase-Komplexes und vermittelt den Transfer von Elektronen von zytosolischem NADPH zu O2, um Superoxid-Anionen zu erzeugen.
  Verwandte Referenzen: PMID:38355798
• In Neuronen beteiligt es sich an der Morphogenese von Dendriten-Spitzen und der Synapsenbildung und reguliert die synaptische Stabilität von GABA(A)-Rezeptoren durch PKN1-vermittelte F‑Aktin-Stabilisierung (nach Homologie).
• Isoform B besitzt eine beschleunigte GEF-unabhängige GDP/GTP-Austauschrate und eine beeinträchtigte GTP-Hydrolyse, eine Eigenschaft, die teilweise durch GTPase-aktivierende Proteine wiederhergestellt wird; es wird vorwiegend in Haut und Darmepithel exprimiert und ist in kolorektalen Tumoren hochreguliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:14625275
• Lokalisiert sich an der Zellmembran, Melanosomen, Zytoplasma, Lamellipodien, Dendriten, Synapsen, Zellkern und Ruffle-Membran, was seine vielseitigen Rollen in Motilität und Signalgebung widerspiegelt.
• Klassifiziert als Phosphoprotein, GTP-bindendes Protein und Lipoprotein und unterliegt Prenylierung, Palmitoylierung und Ubiquitin-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper die Phosphorylierung an Ser71 erkennt, fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren (z. B. Natriumorthovanadit, NaF) zu den Lysepuffern hinzu, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Verifizieren Sie die phosphorylierungsabhängige Detektion, indem Sie Proben mit Lambda-Phosphatase behandeln oder einen Peptid-Wettbewerb mit dem nicht-phosphorylierten Gegenstück durchführen.
• Für Western Blotting wird eine Bande um 21 kDa erwartet; optimieren Sie die Blockierungsbedingungen (z. B. 5 % BSA in TBST), um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• In ELISA immobilisieren Sie das Phospho-Peptid oder beschichten Zellen/Extrakte direkt und verwenden eine nicht-phospho-Kontrolle, um die Spezifität zu bewerten.

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