Phospho-PPP1R12A/PPP1R12B/PPP1R12C (Thr696) Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O14974 / O60237 / Q9BZL4

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PPP1R12A/PPP1R12B/PPP1R12C

• PPP1R12A (auch bekannt als MYPT1) ist eine zentrale regulatorische Untereinheit der Proteinphosphatase 1 (PP1), die die katalytische Untereinheit (PPP1C) an spezifische Substrate dirigiert.
• Es vermittelt die Bindung an Myosin und reguliert als Teil des Myosin-Phosphatase-Komplexes die Dynamik des Zytoskeletts, insbesondere bei Stressfasern.
• Das Protein enthält ANK-Wiederholungen und ist an der Dephosphorylierung von PLK1 beteiligt, was den Zellzyklusablauf beeinflusst.
• PPP1R12A kann die HIF1AN-abhängige Hemmung von HIF1A hemmen und moduliert dadurch Hypoxie-Antwortwege.
• Die Expression ist besonders ausgeprägt in quergestreiften Muskeln, insbesondere in Typ-2a-Fasern, was auf eine Rolle bei der Regulation der Muskelkontraktion hindeutet.
• Das Gen unterliegt alternativem Spleißen, wodurch funktionell unterschiedliche Isoformen entstehen.
• Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Hydroxylierung und direkte Proteinsequenzierung; mit Fokus auf posttranslationale Modifikationen, die seine Aktivität regulieren.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Thr696 von humanem PPP1R12A entspricht. Diese Stelle ist in PPP1R12B und PPP1R12C konserviert.
• Fügen Sie für Western Blot Phosphatase-Inhibitoren zum Lysepuffer hinzu, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten. Verwenden Sie idealerweise phosphatase-behandeltes Lysat als Negativkontrolle.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in relevanten humanen Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie diese Myosin-Phosphatase-Ziele exprimieren, wie z. B. HeLa- oder A431-Zellen.
• Die Phosphorylierung an Thr696 kann durch spezifische Stimuli induziert werden; die Optimierung der Stimulationsbedingungen kann die Signaldetektion verbessern.
• Verwenden Sie für ELISA eine Beschichtung mit phosphoryliertem Peptid-Antigen und vergleichen Sie mit nicht phosphoryliertem Peptid, um die Spezifität zu bestätigen.

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