Phospho-PPP1R12A-S668 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O14974

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PPP1R12A

• PPP1R12A, auch bekannt als MYPT1 (Myosin Phosphatase Targeting Subunit 1), ist die regulatorische Untereinheit 12A der Protein Phosphatase 1 (PP1), einer wichtigen Ser/Thr-Phosphatase.
• Es fungiert als Gerüst, das die katalytische PP1-Untereinheit (PPP1C) zu Myosin lenkt und die Dephosphorylierung von regulatorischen Myosin-Leichtketten sowie die Regulation der Aktomyosin-Kontraktilität ermöglicht.
• Als Teil des Myosin-Phosphatase-Komplexes ist PPP1R12A an der Dephosphorylierung von PLK1 beteiligt und trägt zur Kontrolle des mitotischen Fortschritts bei.
• Das Protein kann die HIF1AN (Faktor, das HIF-1α hemmt)-abhängige Unterdrückung der HIF1A-Aktivität hemmen, was möglicherweise eine Verbindung zwischen Zytoskelett-Signalgebung und Hypoxie-Antworten herstellt.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma und Stressfasern, was mit seiner Rolle bei der Dynamik des Aktomyosin-Zytoskeletts übereinstimmt.
• Es wird in quergestreiften Muskeln exprimiert, insbesondere in Typ-2a-Fasern, was seine Bedeutung für die Muskelkontraktilität unterstreicht.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Phosphorylierung an mehreren Stellen (einschließlich S668) und Hydroxylierung, die seine Aktivität und Interaktionen modulieren.
• Das Gen PPP1R12A (MBS, MYPT1) liegt auf dem menschlichen Chromosom 12 und erzeugt alternative Spleiß-Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Serin 668 ist, wird erwartet, dass der Antikörper spezifisch an dieser Stelle phosphoryliertes PPP1R12A erkennt. Stellen Sie sicher, dass Phosphatase-Inhibitoren in den Lysepuffern enthalten sind, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei etwa 115 kDa vorhergesagt. Erwägen Sie die Beladung von 20–30 µg Zell- oder Gewebslysat und die Verwendung geeigneter Kontrollen, wie z. B. mit Phosphatase behandelten Proben, um die Spezifität zu bestätigen.
• Eine Spezies-Kreuzreaktivität wird für Mensch, Maus und Ratte basierend auf Sequenzhomologie vorhergesagt; dennoch wird eine Validierung im relevanten experimentellen System empfohlen.
• Der Antikörper kann für ELISA geeignet sein; wie bei allen phosphospezifischen Antikörpern kombinieren Sie ihn mit einem Gesamtprotein-Antikörper zur Normalisierung in semiquantitativen Assays.

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