Phospho-PPP1CA-T320 Rabbit mAb für WB, IHC-P, ELISA - P62136

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PPP1CA-Funktion und -Lokalisierung

• PPP1CA kodiert die katalytische Untereinheit der Serin/Threonin-Proteinphosphatase PP1-alpha, die sich mit über 200 regulatorischen Proteinen verbindet, um substratspezifische Holoenzyme zu bilden, die Hunderte von biologischen Zielen dephosphorylieren (PubMed:28216226, PubMed:30158517, PubMed:35768504). Verwandte Referenzen: PMID:28216226 PMID:30158517 PMID:35768504
• PP1-alpha ist essentiell für Zellteilung, Transkriptionsverlängerung, Glykogenstoffwechsel, Muskelkontraktilität und Proteinsynthese (PubMed:35768504, PubMed:35830882, PubMed:35831509). Verwandte Referenzen: PMID:35768504 PMID:35830882 PMID:35831509
• Als katalytische Komponente des PNUTS-PP1-Komplexes fördert PP1-alpha die Freisetzung und Beendigung der Transkriptionspause der RNA-Polymerase II und ist an der Chromatinstruktur und dem Zellzyklusfortschritt während des Mitose-Interphase-Übergangs beteiligt (PubMed:39603239, PubMed:39603240; PubMed:31677974; PubMed:20516061). Verwandte Referenzen: PMID:39603239 PMID:39603240 PMID:31677974 PMID:20516061
• PP1-alpha fungiert in der angeborenen Immunität durch Dephosphorylierung von IFIH1/MDA5 und RIG-I, wodurch antivirale Antworten aktiviert werden, und ist für die Replikation von Alphaviren notwendig (PubMed:23499489). Verwandte Referenzen: PMID:23499489
• PP1-alpha ist eine Kernkomponente des SHOC2-MRAS-PP1c (SMP) Holoenzymkomplexes, der seine Dephosphorylierungsaktivität und Substratspezifität verbessert, insbesondere durch Dephosphorylierung von RAF-Kinasen zur Stimulierung der MAPK-Weg-Aktivierung (PubMed:35768504, PubMed:35830882, PubMed:35831509, PubMed:36175670). Verwandte Referenzen: PMID:35768504 PMID:35830882 PMID:35831509 PMID:36175670
• Subzellulär lokalisiert PP1-alpha im Zytoplasma, Kern (Nukleoplasma und Nukleolus) und in der postsynaptischen Dichte, was konsistent mit seinen Rollen in verschiedenen Signalwegen ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde unter Verwendung eines synthetischen Phospho-Peptids um T320 hergestellt; die Spezifität der Phosphorylierungsstelle sollte durch Phosphatasebehandlung oder Wettbewerb mit dem nicht-phosphorylierten Peptid bestätigt werden.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 37 kDa, aber mehrere Bänder (32 kDa, 37 kDa, 38 kDa) können aufgrund von Isoformen oder posttranslationalen Modifikationen beobachtet werden.
• Erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen (z. B. phosphatasbehandelte Lysate oder Zellen, die zur Modulation der PP1-Aktivität stimuliert wurden), um den Nachweis von phosphoryliertem PPP1CA zu validieren.
• Für IHC-P sollten die Antigen-Retrieval und die optimale Antikörperverdünnung empirisch im relevanten Gewebe- oder Zellproben-system bestimmt werden.

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