Phospho-POLR2A CTD-S2 Kaninchen mAb - P24928

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von POLR2A

• POLR2A kodiert für die größte Untereinheit der RNA-Polymerase II, die die Transkription von mRNA-Vorläufern und vielen nicht kodierenden RNAs katalysiert.
• Bildet zusammen mit POLR2B das aktive Zentrum, das Mg2+-Ionen für die Nukleotidzugabe koordiniert und über eine 3'->5'-Exonuklease-Aktivität Korrekturlesen durchführt. Verwandte Referenzen: PMID:30190596 PMID:8381534
• Besitzt eine einzigartige C-terminale Domäne (CTD) mit 52 Heptapeptid-Wiederholungen (YSPTSPS), die als Plattform für Faktoren dient, die Transkriptionsinitiation, -elongation und -termination regulieren.
• Die CTD-Phosphorylierung an Ser5 fördert das Promotor-Escape, während die Ser2-Phosphorylierung für die Pausenfreigabe und die prä-mRNA-Prozessierung erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:26124092
• Acetylierung und Methylierung von CTD-Lysinen regulieren die Genexpression, wobei Methylierung eine repressive Wirkung hat.
• Zeigt RNA-abhängige RNA-Polymerase-Aktivität und verlängert nicht kodierende RNAs am 3'-Ende.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Kern, Zytoplasma und Chromosomen.
• Relevante Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Acetylierung, Methylierung, DNA-abhängige RNA-Polymerase, Transkription, Hydrolase.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser phosphospezifische Antikörper erkennt POLR2A nur, wenn Ser2 in der CTD-Wiederholung phosphoryliert ist. Fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren zu Lyse- und Waschpuffern hinzu, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Für Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) und CUT&Tag erwägen Sie eine Titration des Antikörpers und die Optimierung der Quervernetzungs-/Sonicationsbedingungen für Ihre spezifischen Ziel-Loci.
• Der Antikörper ist geeignet für Western Blot (217 kDa), Immunfluoreszenz und Immunhistochemie; validieren Sie ihn im entsprechenden Proben-system mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen (z. B. unbehandelte vs. Kinase-Inhibitor-behandelte Zellen).
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts verwenden Sie für WB ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz oder verlängerte Transferzeiten.

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