Phospho-PLN-S16/T17 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P26678

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Phospholamban

• Phospholamban (PLN) ist ein Schlüsselregulator der Kontraktilität des Herzmuskels, codiert durch das PLN-Gen, mit einem Molekulargewicht von ca. 6 kDa (UniProt: P26678).
• Es hemmt reversibel die Sarco/Endoplasmatische Retikulum Ca2+-ATPase 2 (SERCA2/ATP2A2) im sarkoplasmatischen Retikulum des Herzens und senkt die scheinbare Ca2+-Affinität der Pumpe, insbesondere während der Diastole. Verwandte Referenzen: PMID:28890335
• Die Phosphorylierung von PLN an Ser16 und Thr17 hebt die SERCA2-Hemmung auf, fördert die Ca2+-Wiederaufnahme in das sarkoplasmatische Retikulum und beschleunigt die Muskelentspannung.
• Subzellulär lokalisiert sich PLN im endoplasmatischen Retikulum, im sarkoplasmatischen Retikulum und in den mitochondrialen Membranen, was seinen Rollen im intrazellulären Ca2+-Stoffwechsel entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (an Ser16/Thr17), Acetylierung und Palmitoylierung, die seine Aktivität und Membranassoziation modulieren.
• PLN wird vorwiegend im Herzmuskel exprimiert, spielt aber auch Rollen in elongierten Spermatiden und im retikulären Thalamuskern des Gehirns und beeinflusst dort die Keimzelldifferenzierung bzw. die Schlafmuster.
• Mutationen im PLN-Gen sind mit Kardiomyopathien (CMD1P, CMH18) assoziiert, was seine kritische Rolle für die Herzfunktion unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein synthetisches Phospho-Peptid ist, das Ser16 und Thr17 überspannt, wird erwartet, dass der Antikörper spezifisch die doppelt phosphorylierte Form von PLN erkennt; validieren Sie die Spezifität mittels dephosphorylierter Kontrollen oder Phosphatasebehandlung in relevanten ProbenSystemen.
• Für die Western-Blot-Analyse verwenden Sie niedermolekulare Marker und erwägen Sie 15-20% Tris-Tricine-Gele, um das 6 kDa PLN-Band aufzulösen; fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphatasehemmer hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für ELISA kann die Beschichtung mit Phospho-Peptid-Konjugaten und die Verwendung kompetitiver oder blockierender Peptide helfen, die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung empirisch für jede Anwendung; die Einbindung geeigneter positiver und negativer Kontrollen wird empfohlen, um die phospho-abhängige Reaktivität zu bestätigen.

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