Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P19174

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Phospho-PLC gamma 1 (PLCG1)-Y783

• PLCG1 kodiert für 1-Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat-Phosphodiesterase gamma-1, ein Schlüsselenzym in der Phosphoinositid-Signalgebung. Es hydrolysiert PIP2, um die Second Messenger DAG und IP3 zu erzeugen, die Kalzium mobilisieren und Proteinkinase C aktivieren.
• Es wird stromabwärts von Rezeptor-Tyrosinkinasen (z.B. PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs) aktiviert und spielt eine entscheidende Rolle bei der Weiterleitung von Wachstumsfaktorsignalen an intrazelluläre Signalwege.
• PLCG1 ist an der Aktin-Reorganisation und Zellmigration beteiligt, wie durch seine Notwendigkeit für eine effiziente Chemotaxis gezeigt wird (PubMed:17229814). Verwandte Referenzen: PMID:17229814
• Das Protein lokalisiert zu Lamellipodien und Membranausstülpungen, dynamischen Strukturen an der Führungsfront wandernder Zellen, was seine Rolle bei der Zytoskelett-Regulation unterstreicht.
• PLCG1 enthält SH2- und SH3-Domänen, die Wechselwirkungen mit phosphorylierten Tyrosinresten auf aktivierten Rezeptoren vermitteln, und wird selbst an Schlüssel-Tyrosinresten (einschließlich Y783) für die volle Aktivierung phosphoryliert.
• Es unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, und wird als Phosphoprotein, Hydrolase und Signalüberträger klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein phosphoryliertes Peptid hergestellt; er erkennt daher spezifisch an Y783 phosphoryliertes PLCG1. Verwenden Sie für negative Kontrollen Lambda-Phosphatase-behandelte Proben oder einen Wettbewerbsversuch mit nicht-phosphoryliertem Peptid, um die Spezifität zu bestätigen.
• Beim Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von PLCG1 ~149 kDa. Stellen Sie eine ausreichende Trennung hochmolekularer Proteine durch geeignete Gelprozentsätze (z.B. 6-8% SDS-PAGE) und Transferbedingungen sicher.
• Für ELISA kann der Antikörper als Detektionsantikörper in einem phosphospezifischen Sandwich-ELISA-Format verwendet werden. Validieren Sie dies im relevanten Probensystem, z.B. stimulierten vs. nicht-stimulierten Zelllysaten.
• Beim Nachweis endogener PLCG1-Phosphorylierung sollten Sie die Stimulation von Zellen mit Wachstumsfaktoren (z.B. EGF, PDGF) in Betracht ziehen, von denen bekannt ist, dass sie Rezeptor-Tyrosinkinasen aktivieren, die PLCG1 an Y783 phosphorylieren.
• Es wird Kreuzreaktivität mit Maus angegeben; bestätigen Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem spezifischen Versuchsmodell und validieren Sie den Antikörper bei Bedarf für andere Spezies.
• Da es sich um einen polyklonalen Kaninchenantikörper handelt, kann es Chargenschwankungen geben; führen Sie geeignete Kontrollen durch und titrieren Sie für eine optimale Konzentration.

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