Phospho-PKCδ/θ-S643/676 Kaninchen pAb - Q05655/Q04759

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Proteinkinase C Delta Type

• Die Proteinkinase C Delta (PKCδ), kodiert durch das PRKCD-Gen, ist eine kalziumunabhängige, phospholipid- und diacylglycerol (DAG)-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die zur neuartigen PKC-Unterfamilie gehört. Sie ist auch als nPKC-delta bekannt und besitzt Tyrosin-Proteinkinase-Aktivität.
• PKCδ spielt eine Doppelrolle bei der Apoptose: Sie wirkt als pro-apoptotisches Protein während DNA-Schaden-induzierter Apoptose und als anti-apoptotisches Protein während Zytokinrezeptor-initiierter Zelltod. Verwandte Referenzen: PMID:21406692, PMID:21810427
• Sie fungiert als Regulator der B-Zell-Proliferation und ist entscheidend für die Induktion der Selbstantigen-induzierten B-Zell-Toleranz.
• Als Reaktion auf oxidativen Stress phosphoryliert und aktiviert PKCδ CHUK/IKKA im Zellkern, was zur Phosphorylierung von p53/TP53 und nachgeschalteter apoptotischer Signalgebung führt. Verwandte Referenzen: PMID:21406692, PMID:21810427
• PKCδ zeigt gegensätzliche Rollen in Krebs: Sie kann als Tumorsuppressor bei mitogener Stimulation wirken, wird jedoch in vielen Krebsarten hoch exprimiert und fördert das Zellüberleben und Chemoresistenz über Wege einschließlich NF-kappa-B, AKT1 und MAPK1/3. Verwandte Referenzen: PMID:15774464
• Sie wird für die NADPH-Oxidase-Aktivität und Superoxidanionen-Produktion in Neutrophilen und Eosinophilen benötigt, unter Beteiligung der Phosphorylierung von NCF1 (p47-phox). Verwandte Referenzen: PMID:19801500, PMID:11748588
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, perinukleäre Region, Zellkern, Zellmembran, Mitochondrien und Endomembransystem, was ihre dynamischen Signalrollen widerspiegelt.
• PKCδ enthält charakteristische Phorbolester/DAG-Typ-Zinkfinger-Domänen und unterliegt alternativem Spleißen, Phosphorylierung und anderen posttranslationalen Modifikationen, die ihre Funktion und subzelluläre Verteilung regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper gegen ein synthetisches Phosphopeptid gerichtet ist, das Ser643 von humanem PKCδ entspricht (das Homologie zu Ser676 von PKCθ aufweist), wird erwartet, dass er spezifisch die phosphorylierten Formen beider Kinasen erkennt. Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit dem relevanten Ziel in Ihrem Modellsystem.
• Für Western Blot umfassen die vorhergesagten Molekulargewichte 77 kDa und andere Isoformen (67, 74, 80, 81 kDa) aufgrund von alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen. Schließen Sie Phosphatase-behandelte Lysate als negative Kontrolle ein, um die Phospho-Spezifität zu überprüfen.
• Die Aktivierung und Phosphorylierung von PKCδ an Ser643 kann durch Phorbolester (z.B. PMA), oxidativen Stress (z.B. H2O2) oder DNA-schädigende Agenzien stimuliert werden. Berücksichtigen Sie geeignete Stimulationsbedingungen bei der Vorbereitung von Zell- oder Gewebelysaten.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von Phospho-PKCδ/θ in Zellysaten oder gereinigten Proteinen verwendet werden. Optimieren Sie Beschichtungs- und Nachweismethoden gemäß Standardverfahren.

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