Phospho-PKCalpha/beta II-T638/641 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17252 / P05771

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKC alpha/beta II Funktion und Lokalisierung

• Proteinkinase C alpha Typ (PKC alpha) ist eine calciumaktivierte, phospholipid- und diacylglycerolabhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die durch das PRKCA-Gen kodiert wird. Sie spielt eine zentrale Rolle bei der Regulation von Zellproliferation, Apoptose, Differenzierung, Migration, Adhäsion, Tumorgenese, kardialer Hypertrophie, Angiogenese, Thrombozytenfunktion und Entzündung.
• PKC alpha lokalisiert im Zytoplasma, der Zellmembran, der Mitochondrienmembran und dem Zellkern und translokiert nach Aktivierung dynamisch in spezifische Kompartimente, um ihre vielfältigen Funktionen auszuüben.
• Während der Chemokin-induzierten CD4+ T-Zellmigration phosphoryliert PKC alpha den CDC42-Guanin-Austauschfaktor DOCK8, was zu dessen Dissoziation von LRCH1 und der anschließenden Aktivierung der GTPase CDC42 führt und so die Zellmotilität fördert. Verwandte Referenzen: PMID:28028151
• Als Antwort auf Angiotensin II-Signalgebung phosphoryliert PKC alpha KLHL3 an 'Ser-52', was die Interaktion zwischen KLHL3 und WNK4 verringert und so den Ionentransport und die Blutdruckregulation moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:25313067
• PKC alpha phosphoryliert und aktiviert LRRK1, welches wiederum RAB-Proteine phosphoryliert, die am intrazellulären Transport beteiligt sind, und unterstreicht so eine Rolle im vesikulären Transport. Verwandte Referenzen: PMID:36040231
• Sie ist in verschiedenen Krebsarten, einschließlich Gliomen und Brustkrebs, hoch exprimiert, wo sie als Tumorpromotor wirkt und durch Regulation von Zellproliferation, Apoptose und Migration an malignen Phänotypen beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um T638 von humanem PKCalpha/beta II. Erwägen Sie, den Antikörper in Ihrem experimentellen System zu validieren, indem Sie Zellen vor der Analyse mit PMA oder anderen PKC-Aktivatoren behandeln, um die Phosphorylierung an T638/641 zu verstärken.
• Für Western Blotting verwenden Sie geeignete Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung, um das Phospho-Epitop zu erhalten. Es wird eine Bande bei etwa 76–77 kDa erwartet.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) führen Sie, falls erforderlich, eine Antigen-Demaskierung durch und schließen Phosphataseinhibitoren in die Inkubationsschritte ein, um die Phosphorylierungssignale zu erhalten.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) überwachen Sie die Translokation von phosphoryliertem PKC vom Zytoplasma zur Membran nach Aktivierung als positive Kontrolle.
• In ELISA validieren Sie die Spezifität unter Verwendung sowohl phosphorylierter als auch nicht-phosphorylierter Peptide, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.

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