Phospho-PKC alpha-T638 Kaninchen mAb - P17252

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PKC alpha

• Protein kinase C alpha Typ ist eine calciumaktivierte, phospholipid- und diacylglycerol-(DAG)-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die vielfältige zelluläre Prozesse reguliert: Proliferation, Apoptose, Differenzierung, Migration, Adhäsion, Tumorentstehung, kardiale Hypertrophie, Angiogenese, Thrombozytenfunktion und Entzündung.
• Es phosphoryliert Substrate wie RAF1 (MAPK-Signalweg), BCL2 (antiapoptotisch) und kardiales Troponin T (TNNT2), um die myokardiale Kontraktilität zu modulieren.
• Bei der chemokin-induzierten Migration von CD4(+)-T-Zellen phosphoryliert es DOCK8, was zur Aktivierung von CDC42 und zur T-Zellmigration führt. Verwandte Referenzen: PMID:28028151
• Als Reaktion auf das Angiotensin-II-Signal phosphoryliert es KLHL3, wodurch die Interaktion zwischen KLHL3 und WNK4 verringert wird, was zur Regulation der Ionengleichgewicht beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:25313067
• Es phosphoryliert und aktiviert LRRK1, das anschließend RAB-Proteine phosphoryliert, die am intrazellulären Transport beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:36040231
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zellmembran, Mitochondrienmembran und Zellkern.
• PKC alpha wird in einer Reihe von Krebszellen stark exprimiert, wo es als Tumorpromotor wirken kann und ist an malignen Phänotypen mehrerer Tumore wie Gliome und Brustkrebse beteiligt.
• Es gehört zur Familie der Proteinkinasen, enthält eine C2-Domäne und Phorbolester/DAG-Zinkfinger und wird als Protoonkogen klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Position T638, was die Spezifität für die phosphorylierte Form gewährleistet. Verwenden Sie geeignete positive und negative Kontrollen (z. B. mit Phosphatase behandelte Proben), um die Phosphospezifität zu bestätigen.
• Für Western Blotting empfehlen sich niedrigfluoreszierende PVDF-Membranen und Blockierung mit BSA, um Hintergrundsignale zu minimieren, da phosphorylierungsspezifische Antikörper empfindlich auf milchbasierte Blockierungsmittel reagieren können.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem Probenystem durch Vergleich der Signale von stimulierten und unstimulierten Zellen, bei denen PKC alpha bekanntermaßen aktiviert wird.
• Obwohl der Antikörper für WB und ELISA empfohlen wird, kann er nach entsprechender Optimierung auch für andere Anwendungen geeignet sein.

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