Phospho-PI3KP85α/P55γ/P85β-Y467/Y464/Y199 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - P27986 / O00459 / Q92569

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der PI3K-Regulatoruntereinheiten (p85α/p55γ/p85β)

• PIK3R1 kodiert die regulatorische Alpha-Untereinheit der Phosphatidylinositol-3-Kinase, auch bekannt als PI3-Kinase p85-alpha. Es existieren mehrere Isoformen durch alternatives Spleißen, einschließlich Isoform 2, die in Skelettmuskel und Gehirn exprimiert wird.
• Die p85-alpha-Untereinheit fungiert als Adapter, die über ihre SH2-Domäne an aktivierte (phosphorylierte) Proteintyrosinkinasen bindet und vermittelt die Assoziation der katalytischen p110-Untereinheit an die Plasmamembran.
• Sie ist notwendig für die insulin-stimulierte Glukoseaufnahme und Glykogensynthese in insulinempfindlichen Geweben und spielt eine Schlüsselrolle in der Insulinsignalgebung.
• Spielt eine Rolle in der Signalgebung downstream verschiedener Wachstumsfaktorrezeptoren, einschließlich FGFR1-4, KIT, PDGFRA und PDGFRB, sowie in der Integrin-ITGB2-Signalgebung. Verwandte Referenzen: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• Moduliert die zelluläre Antwort auf ER-Stress durch Förderung der nukleären Translokation von XBP1-Isoform 2 und trägt zur Verbesserung der Glukosetoleranz unter metabolischer Überlastung in der Leber bei. Verwandte Referenzen: PMID:20348923
• Lokalisiert primär im Zytoplasma, wo sie mit mehreren Signalgebungspartnern interagiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (an Tyrosinresten wie Y467), Acetylierung und Ubiquitinierung, die ihre Aktivität und Stabilität regulieren.
• Fehlregulation von Komponenten des PI3K-Signalwegs ist impliziert bei Krebs, Stoffwechselerkrankungen und Entwicklungsstörungen wie Zwergwuchs.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphospezifisches Peptid, das den Resten um Y467 von humanem PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3 entspricht. Aufgrund der Sequenzkonservierung kreuzreagiert der Antikörper mit Maus- und Rattenarten.
• Für Western Blot denaturieren Sie die Proben in Laemmli-Puffer und laden Sie 20–30 µg Gesamtprotein pro Spur. Die detektierten Bänder können je nach spezifischer Isoform zwischen 42–54 kDa (p55γ/p85β) und 81–84 kDa (p85α) erscheinen.
• Phosphorylierungsspezifische Antikörper erfordern eine sorgfältige Handhabung: Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen und erwägen Sie die Verwendung von Phosphatasehemmern während der Probenvorbereitung, um Phosphorylierungssignale zu erhalten.
• Verwenden Sie geeignete positive Kontrollen (z. B. insulin-stimulierte oder mit Wachstumsfaktoren behandelte Zelllysate) und negative Kontrollen (Blockierung durch nicht-phosphoryliertes Peptid oder Phosphatasebehandlung), um die Spezifität zu bestätigen.

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