Phospho-PDK1/PDPK1-S241 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O15530

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDK1/PDPK1-Funktion und -Lokalisierung

• PDK1 (PDPK1) ist eine maßgebliche Serin/Threonin-Kinase, die eine Untergruppe von Kinasen der AGC-Familie phosphoryliert und aktiviert, darunter AKT/PKB, p70 S6-Kinase, p90 RSK, PKC, SGK und PAK1, und reguliert so Zellproliferation, Überleben, Stoffwechsel und Genexpression. Verwandte Referenzen: PMID:10226025, PMID:10480933, PMID:10995762
• Sie spielt eine zentrale Rolle in der Insulinsignaltransduktion durch Phosphorylierung von AKT/PKB, was downstream-Signale weiterleitet, die die Glukoseaufnahme, Aminosäureaufnahme, Speicherung, Zellproliferation und das Überleben steuern. Verwandte Referenzen: PMID:10226025, PMID:12167717, PMID:9094314
• PDK1 reguliert die TGF-Beta-Signalgebung negativ durch Modulation der SMAD-Proteinwechselwirkungen und -phosphorylierung sowie durch Verhinderung der nukleären Translokation von SMAD3 und SMAD4. Verwandte Referenzen: PMID:17327236
• Sie aktiviert den NF-Kappa-B-Weg durch Phosphorylierung von IKKB und trägt so zu Entzündungsreaktionen bei. Verwandte Referenzen: PMID:16207722
• Die tyrosinphosphorylierte Form von PDK1 ist entscheidend für die Dynamik der Fokaladhäsionen als Reaktion auf Angiotensin II. Verwandte Referenzen: PMID:14585963
• PDK1 ist essentiell für die Motilität und Chemotaxis von vaskulären Endothelzellen und spielt eine Rolle bei der Angiogenese. Verwandte Referenzen: PMID:17371830
• Sie lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern, an der Zellmembran und in den Fokaladhäsionen, was ihre multifunktionalen Rollen widerspiegelt.
• PDK1 ist ubiquitär exprimiert; die an Tyr-9 phosphorylierte Form ist in erkranktem Gewebe von Lunge, Leber, Dickdarm und Brust erhöht.
• Alternatives Spleißen erzeugt eine katalytisch inaktive Isoform; das Protein unterliegt Azetylierung und ubiquitinähnlicher Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein phosphospezifisches Peptid hergestellt, das den Resten um Ser241 von humanem PDK1 entspricht; er erkennt die phosphorylierte Form. Verwenden Sie für WB und IF/ICC Phosphatase-Inhibitoren in Lyse- und Fixierungspuffern.
• Für WB wird eine Bande bei ~63 kDa erwartet. Verwenden Sie stimulierte vs. unstimulierte Zelllysate (z. B. insulinbehandelt) als positive/negative Kontrollen.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht Studien in diesen Spezies; validieren Sie die Antikörperspezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Für ELISA sollten Sie die Verwendung eines phosphorylierten Peptids als Standard und eines nicht-phosphorylierten Peptids zur Bestätigung der Phosphospezifität in Betracht ziehen.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Anwendung; vorgeschlagene Startbereiche können experimentell ermittelt werden.

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