Phospho-PDK1/PDPK1-S241 Kaninchen pAb - O15530

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PDK1 (3-Phosphoinositid-abhängige Proteinkinase 1)

• PDPK1 (PDK1) codiert eine ubiquitär exprimierte Serin/Threonin-Kinase, die als Masterregulator der AGC-Kinase-Familie fungiert, einschließlich PKB/AKT, p70 S6K, p90 RSK und PKC-Isoformen. Zugehörige Referenzen: PMID:10226025 PMID:10480933 PMID:10995762

• Im Insulinsignalweg phosphoryliert PDK1 AKT1 an Thr308 und aktiviert es, wodurch nachgeschaltete Signale weitergeleitet werden, die die Glukoseaufnahme, Glykogensynthese und Zellüberleben steuern. Zugehörige Referenzen: PMID:10226025 PMID:12167717 PMID:9094314

• PDK1 ist im Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran und in Fokalkontakten lokalisiert, was vielfältige Signale aus mehreren zellulären Kompartimenten ermöglicht.

• Die tyrosinphosphorylierte Form von PDK1 ist essenziell für die Dynamik von Fokalkontakten und wird in erkrankten Geweben von Lunge, Leber, Dickdarm und Brust hochreguliert. Zugehörige Referenzen: PMID:14585963

• PDK1 moduliert weitere Signalwege: Es reguliert den TGF-beta-Signalweg negativ durch Phosphorylierung von SMAD-Proteinen und aktiviert NF-κB via IKKB-Phosphorylierung, wodurch es Entzündungs- und Immunantworten beeinflusst. Zugehörige Referenzen: PMID:17327236 PMID:16207722

• PDK1 ist kritisch für die Motilität und Chemotaxis von vaskulären Endothelzellen und beteiligt sich an angiogenen Prozessen. Zugehörige Referenzen: PMID:17371830

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Phosphospezifische Antikörper erfordern sorgfältige Probenhandhabung: Fügen Sie Lysepuffern Phosphataseinhibitoren hinzu und vermeiden Sie eine längere Inkubation der Probe bei Raumtemperatur.
• Bestätigen Sie bei Western Blotting die Phosphospezifität der Bande bei ~63 kDa, indem Sie einen Teil der Probe mit Lambda-Phosphatase behandeln.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) können Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen die Epitopzugänglichkeit beeinflussen; testen Sie mehrere Fixierungsmethoden (z. B. Methanol vs. Formaldehyd) für ein optimales Signal.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte validieren Sie den Antikörper im vorgesehenen Speziesmodell durch Sequenzalignment der Phosphorylierungsstelle und des Antigenbereichs.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung eines Phosphopeptid-Konkurrenten die Signalsspezifität verbessern.

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