Phospho-PDHA1-S293 Kaninchen-mAk - P08559

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDHA1-Funktion und -Lokalisation

• PDHA1 (Pyruvatdehydrogenase E1-Komponente Untereinheit alpha, somatische Form, mitochondrial), auch bekannt als PDHE1-A Typ I, wird beim Menschen durch das PDHA1-Gen kodiert. Es ist ein entscheidendes Stoffwechselenzym, das zusammen mit PDHB die heterotetramere E1-Untereinheit des Pyruvatdehydrogenase (PDH)-Komplexes bildet.
• Der PDH-Komplex katalysiert die Gesamtumwandlung von Pyruvat in Acetyl-CoA und CO2 und verbindet so die cytoplasmatische Glykolyse mit dem mitochondrialen Tricarbonsäure (TCA)-Zyklus. Verwandte Referenzen: PMID:19081061 PMID:7782287
• Insbesondere katalysiert die E1-Untereinheit die Thiaminpyrophosphat (TPP)-abhängige Decarboxylierung von Pyruvat und die reduktive Acetylierung von Lipoylgruppen, die kovalent an die E2-Komponente gebunden sind. Verwandte Referenzen: PMID:17474719 PMID:19081061 PMID:7782287
• PDHA1 gehört zur Pyruvatdehydrogenase-Komplex-Genfamilie; Mutationen in diesem Gen sind mit primären mitochondrialen Erkrankungen und dem Leigh-Syndrom assoziiert.
• Subzellulär lokalisiert PDHA1 in der Mitochondrienmatrix, was seiner Rolle im Pyruvatstoffwechsel entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (z.B. an Ser293) und Acetylierung, welche die Enzymaktivität modulieren. Schlüsselwörter: Acetylierung, Phosphoprotein, Thiaminpyrophosphat, Magnesium, Metallbindung.
• Das Protein ist ubiquitär in Geweben exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den um Ser293 des humanen PDHA1 herumliegenden Resten entspricht und eine phosphorylierungsspezifische Epitope anzielt. Dies macht den Antikörper geeignet, um endogen phosphoryliertes PDHA1 unter geeigneten Stimulationsbedingungen nachzuweisen.
• Für Western Blot: PDHA1 hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von 43 kDa; optimieren Sie die Blockierung und die Primärantikörperverdünnung unter Verwendung von Lysaten aus menschlichen, murinen oder ratten Zellen/Geweben.
• Für Immunpräzipitation: Das Kaninchen-monoklonale Format kann hohe Spezifität bieten; validieren Sie die Aufnahmeeffizienz mit Phospho-positiven und -negativen Kontrollen.
• ELISA-Anwendungen sind validiert; optimieren Sie Beschichtungsantigen und Nachweiskonditionen für die quantitative Phospho-Analyse.
• Die berichtete Kreuzreaktivität umfasst Maus und Ratte; überprüfen Sie die Sequenzhomologie um die Phosphorylierungsstelle, wenn Sie auf andere Spezies erweitern.

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