Phospho-PAK2-S20 Kaninchen-polyklonale Antikörper für WB & ELISA - Q13177

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PAK2

• PAK2 ist eine Serin/Threonin-Kinase, die als nachgeschalteter Effektor von CDC42 und RAC1 wirkt. Nach Bindung an GTPasen erfolgt eine Autophosphorylierung, um die Zytoskelettdynamik, Zellmotilität und Proliferation zu regulieren (PubMed:7744004, PubMed:12853446, PubMed:16617111, PubMed:19273597).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:7744004 PMID:12853446 PMID:16617111 PMID:19273597
• Volllängen-PAK2 fördert das Zellüberleben, während die Caspase-Spaltung bei DNA-Schäden ein proapoptotisches p34-Fragment ergibt, das in den Zellkern transloziert und den JNK-Signalweg aktiviert (PubMed:12853446, PubMed:16617111, PubMed:9171063).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:12853446 PMID:16617111 PMID:9171063
• Seine Kinaseaktivität phosphoryliert zahlreiche Substrate: Histon H4 für die Nukleosomen-Assemblierung, JUN für die EFG-induzierte Proliferation, MAPK4/6 zur Regulation der Migration und CASP7 zur Verhinderung der Apoptose (PubMed:21724829, PubMed:21177766, PubMed:21317288, PubMed:21555521, PubMed:27889207).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:21724829 PMID:21177766 PMID:21317288 PMID:21555521 PMID:27889207
• Kinase-unabhängige Funktionen umfassen die Ausrichtung der mitotischen Spindel durch die Assoziation mit ARHGEF7 und GIT1 (PubMed:19273597, PubMed:19923322).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19273597 PMID:19923322
• Wird ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Skelettmuskel, Eierstock, Thymus und Milz.
• Zeigt eine dynamische subzelluläre Verteilung und lokalisiert sich im Zytoplasma, Zellkern, perinukleären Bereich und an der Membran.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Fügen Sie für den Western Blot Phosphatase-Inhibitoren zum Lysepuffer hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten. Überprüfen Sie die Spezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase.
• Das Immunogen ist ein Phosphopeptid um Ser20; die Kreuzreaktivität mit unphosphoryliertem PAK2 kann minimal sein, sollte aber validiert werden.
• Geeignet für den Nachweis der PAK2-Aktivierung in Zelllinien nach Behandlung mit Wachstumsfaktoren oder apoptotischen Stimuli; erwägen Sie die Einbeziehung von Positiv- und Negativkontrollen.
• Der Antikörper wirkt nachweislich in ELISA; geeignete Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen sollten optimiert werden.
• Kreuzreaktivität mit PAK2 von Maus und Ratte ist angegeben; das Sequenzalignment zeigt eine hohe Konservierung um die Phosphorylierungsstelle, dennoch wird eine lokale Validierung empfohlen.

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