Phospho-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1-T359/S363 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - Q15418

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RPS6KA1/RSK1

• Proteinidentität: RPS6KA1 kodiert die 90 kDa große ribosomale Protein S6-Kinase alpha-1 (RSK1/p90RSK), eine Serin/Threonin-Kinase der p90RSK-Familie; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Effektor des ERK-MAPK-Signalwegs: Wirkt stromabwärts von ERK1/2 und phosphoryliert die Transkriptionsfaktoren CREB1, ETV1/ER81, NR4A1/NUR77 sowie den Kofaktor CREBBP, wodurch die Expression von unmittelbaren Frühgenen und die Mitogenese gefördert werden.
  Verwandte Referenzen: PMID:18508509 PMID:18813292 PMID:12213813 PMID:16223362
• Translationsinitiation: Verbessert die cap-abhängige Translation durch Phosphorylierung von RPS6 und EIF4B als Reaktion auf Insulin oder Wachstumsfaktoren.
  Verwandte Referenzen: PMID:16763566 PMID:17360704
• Modulator der mTOR-Signalgebung: Reguliert die Aktivität von mTORC1 und mTORC2 durch Phosphorylierung von TSC2 und RPTOR und wirkt über DEPTOR rückgekoppelt.
  Verwandte Referenzen: PMID:15342917 PMID:22017876
• Anti-apoptotische Effekte: Hemmt pro-apoptotische Proteine wie BAD und DAPK1 und fördert das Überleben von hepatischen Sternzellen und Hepatozyten durch Phosphorylierung von CEBPB.
  Verwandte Referenzen: PMID:10679322 PMID:16213824 PMID:11684016 PMID:18508509 PMID:18813292
• Zellmigration: Phosphoryliert EPHA2 an Ser-897, um die Zellmotilität zu steuern.
  Verwandte Referenzen: PMID:26158630
• Subzelluläre Lokalisation und Regulation: Pendelt zwischen Zellkern und Zytoplasma; die Kinaseaktivität wird durch Mehrstellenphosphorylierung gesteuert, einschließlich der aktivierungsrelevanten Reste Thr359 und Ser363, die von diesem Antikörper erkannt werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser phosphospezifische Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid mit phosphoryliertem Thr359 und Ser363 erzeugt. Für das Western Blotting bestätigen Sie die Spezifität durch Vorinkubation des Antikörpers mit dem nicht phosphorylierten Peptid oder durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase vor dem Immunoblotting.
• Verwenden Sie bei WB milde oder phosphatfreie Blockierungspuffer (z. B. BSA oder fettfreie Trockenmilch ohne Phosphataseinhibitoren), um die Antigenerkennung zu erhalten. Optimieren Sie empirisch die Verdünnung des Primärantikörpers (typischerweise 1:500–1:2000) für Ihre Probenart und Ihr Detektionssystem.
• Für ELISA beschichten Sie das Phosphopeptid oder Proteinextrakt und titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen. Verwenden Sie als Negativkontrolle ein nicht phosphoryliertes Peptid.
• Induzieren Sie die RPS6KA1-Phosphorylierung in humanen Zelllinien durch Behandlung mit EGF (50 ng/mL) oder Insulin (100 nM) für 15–30 Minuten vor dem Aufschluss, da RSK1 durch den ERK-Signalweg stark aktiviert wird.
• Kreuzreaktivität wurde für humane Proben nachgewiesen; für andere Arten überprüfen Sie vor der Verwendung die Sequenzidentität der Immunogenregion.

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