Phospho-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1-S363 Kaninchen pAb - Q15418

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Ribosomales Protein S6 Kinase Alpha-1 (RSK1) Funktion und Lokalisierung

• Ribosomale Protein S6 Kinase Alpha-1 (RSK1, p90RSK1) ist eine Serin/Threonin-Kinase, die vom RPS6KA1-Gen kodiert wird und stromabwärts des ERK1/2 MAPK-Signalwegs wirkt, um mitogene und Stresssignale zu integrieren.
• RSK1 phosphoryliert den Transkriptionsfaktor CREB1 als Reaktion auf EGF und trägt so zur Expression von Immediate-Early-Genen und zur Zellproliferation bei. Verwandte Referenzen: PMID:18508509 PMID:18813292
• Es aktiviert die Transkriptionsfaktoren NR4A1/NUR77 und ETV1/ER81 sowie den Coaktivator CREBBP und moduliert so Transkriptionsprogramme. Verwandte Referenzen: PMID:12213813 PMID:16223362
• Im Zytoplasma reguliert RSK1 die cap-abhängige Translation durch Phosphorylierung von RPS6 und EIF4B und fördert so die Assemblierung des Translations-Präinitiationskomplexes. Verwandte Referenzen: PMID:17360704 PMID:16763566
• RSK1 ist ein kritischer Knotenpunkt im mTOR-Signalnetzwerk: Es phosphoryliert direkt TSC2 und RPTOR, um die mTORC1-Aktivität zu steuern, und trägt durch Targeting von DEPTOR zur Rückkopplungsregulation bei. Verwandte Referenzen: PMID:15342917 PMID:22017876
• Die Kinase fördert das Zellüberleben durch Phosphorylierung der pro-apoptotischen Proteine BAD und DAPK1, wodurch ihre apoptotischen Funktionen gehemmt werden. Verwandte Referenzen: PMID:10679322 PMID:16213824
• RSK1 reguliert den Zellzyklusfortschritt durch Phosphorylierung des CDK-Inhibitors CDKN1B (p27Kip1), was zu dessen zytoplasmatischer Sequestrierung über 14-3-3-Bindung und Aufhebung der G1-Blockade führt. Verwandte Referenzen: PMID:18508509 PMID:18813292
• Darüber hinaus steuert RSK1 die Zellmigration durch Phosphorylierung von EPHA2 an Ser-897 und beeinflusst so die RPS6KA-EPHA2-Signalachse. Verwandte Referenzen: PMID:26158630
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, was mit seinen multifunktionalen Rollen in der Signalübertragung und Genregulation übereinstimmt. Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen mehrere Phosphorylierungsereignisse, die für seine Aktivierung essentiell sind (UniProt-Keywords: Phosphoprotein, Serin/Threonin-Protein-Kinase, Stressantwort).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Aminosäureresten um Ser363 von humanem RSK1 entspricht; diese Stelle ist ein bekannter regulatorischer Phosphorylierungsort in der Kinase-Linker-Region. Für Western Blotting sollte das Band bei ~83 kDa unter geeigneten Stimulationsbedingungen (z.B. Serum- oder EGF-Behandlung) verifiziert und die Phospho-Spezifität durch Phosphatase-Behandlung oder Wettbewerb mit nicht-phosphoryliertem Peptid bestätigt werden.
• Berichtete Anwendungen umfassen WB, IP und ELISA. Bei der Durchführung von Immunpräzipitationen sollte die Antikörperkonzentration optimiert und die Verwendung frischer Lysate mit Phosphataseinhibitoren zum Erhalt der Phosphorylierung in Betracht gezogen werden.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Ratten-RSK1. Für Anwendungen in Rattenproben sollte der Nachweis des homologen Phospho-Epitops in Ihrem experimentellen System validiert werden.
• Da die RSK1-Aktivierung vom ERK-Signalweg abhängt, sollten geeignete positive Kontrollen (z.B. PMA- oder EGF-stimulierte Zelllinien) eingeschlossen und die Gesamt-RSK1-Spiegel zur Normalisierung der Phospho-Signale überwacht werden.

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