Phospho-p70 S6 Kinase 1-T421/S424 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P23443

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der ribosomalen Protein S6-Kinase beta-1

• Serin/Threonin-Proteinkinase, die als nachgeschaltetes Element des mTOR-Signalwegs als Reaktion auf Wachstumsfaktoren und Nährstoffe wirkt, um Zellproliferation, Zellwachstum und Zellzyklusprogression zu fördern; reguliert die Proteinsynthese durch Phosphorylierung von EIF4B, RPS6 und EEF2K und trägt zum Zellüberleben bei, indem sie die pro-apoptotische Funktion von BAD hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:11500364, PMID:12801526, PMID:14673156
• Unter Bedingungen von Nährstoffmangel assoziiert sich die inaktive Form mit dem Translationsinitiationskomplex EIF3; nach mitogener Stimulation führt die Phosphorylierung durch mTORC1 zur Dissoziation vom EIF3-Komplex und zur Aktivierung. Kontrolliert zudem die Translationsinitiation, indem es einen negativen Regulator von EIF4A, PDCD4, phosphoryliert und für die Ubiquitinierung und anschließende Proteolyse markiert. Verwandte Referenzen: PMID:16286006, PMID:17053147
• Spielt eine Rolle bei der Rückkopplungsregulation von mTORC2 durch mTORC1 durch Phosphorylierung von MAPKAP1/SIN1, MTOR und RICTOR, was zur Hemmung der mTORC2- und AKT1-Signalgebung führt; ist zudem an der Rückkopplungsregulation von mTORC1 und mTORC2 durch Phosphorylierung von DEPTOR beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:15899889, PMID:19720745, PMID:19935711, PMID:22017876
• Vermittelt die TNF-induzierte Insulinresistenz durch Phosphorylierung von IRS1 an mehreren Serinresten, was zu einer beschleunigten Degradation von IRS1 führt. Verwandte Referenzen: PMID:18952604
• Phosphoryliert und aktiviert das Enzym CAD der Pyrimidinbiosynthese, nachgeschaltet von MTOR; phosphoryliert EPRS und spielt dadurch eine Schlüsselrolle bei der Fettsäureaufnahme durch Adipozyten und höchstwahrscheinlich auch bei der Interferon-gamma-induzierten Translationshemmung. Verwandte Referenzen: PMID:23429703, PMID:28178239
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern, äußere Mitochondrienmembran und Synapse.
• Wird in vielen Geweben breit exprimiert.
• Enthält multiple Phosphorylierungsstellen, Acetylierung und alternative Initiation; gehört zur Familie der AGC-Kinasen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Erwägen Sie eine Phosphatasebehandlung von Lysaten oder die Blockierung mit nicht phosphoryliertem Peptid, um die Phosphospezifität des Antikörpers zu bestätigen.
• Für den Western Blot wird empfohlen, den Antikörper mit Positivkontrolllysaten aus Zellen zu validieren, die mit Wachstumsfaktoren stimuliert oder unter nährstoffreichen Bedingungen kultiviert wurden, um die Phosphorylierung von p70 S6 Kinase 1 an T421/S424 zu induzieren.
• Der Antikörper ist ein Kaninchen-Polyclonal; führen Sie Titrationsexperimente durch, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihre spezifischen Versuchsbedingungen zu ermitteln.
• Kreuzreaktivität wurde für Proben von Mensch, Maus und Ratte beobachtet; validieren Sie vor umfangreichen Experimenten in Ihrem relevanten Spezies-Modellsystem.
• Stellen Sie für die ELISA-basierte Detektion sicher, dass das Capture/Detection-Antikörperpaar zwischen phosphorylierten und nicht phosphorylierten Formen unterscheidet.

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