Phospho-p53-S6 Kaninchen pAb - P04637

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von p53

• Das zelluläre Tumorantigen p53 ist ein multifunktionaler Transkriptionsfaktor und Tumorsuppressor, der als Reaktion auf zellulären Stress Zellzyklusarrest, DNA-Reparatur oder Apoptose induziert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• p53 reguliert die Zellteilung negativ durch Aktivierung von Genen wie Cyclin-abhängigen Kinase-Inhibitoren und steuert die Apoptose durch Modulation der Expression von BAX, FAS und Bcl-2.
  Zugehörige Referenzen: PMID:12524540, PMID:17189187
• Das Protein wird durch das TP53-Gen kodiert, das auch unter den Aliassen BCC7, LFS1, BMFS5 und TRP53 bekannt ist; durch alternatives Spleißen und unterschiedliche Promoternutzung entstehen mehrere Isoformen.
• Subzellulär shuttlelt p53 zwischen Zytoplasma und Zellkern und lokalisiert unter anderem im PML-Körper, endoplasmatischen Retikulum, Mitochondrienmatrix und Zentrosom, was seine vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• p53 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Ubiquitinierung und Methylierung, die seine Stabilität und Aktivität regulieren; die Phosphorylierung an Serin 6 (S6) ist ein wichtiges regulatorisches Ereignis.
• Als Tumorsuppressor ist p53 an dem Li-Fraumeni-Syndrom und verschiedenen Krebsarten beteiligt und interagiert mit viralen Proteinen, was seine Rolle bei Wirt-Virus-Interaktionen unterstreicht.
• p53 spielt zudem eine Rolle bei der Regulierung des Circadianrhythmus, indem es die CLOCK-BMAL1-vermittelte PER2-Transkription reprimiert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:24051492
• Die Gewebeexpression ist ubiquitär, wobei spezifische Isoformen gewebeabhängige Muster aufweisen; zum Beispiel ist Isoform 2 in Gehirn und Lunge nicht vorhanden, während Isoform 8 auf Dickdarm, Knochenmark und einige andere Gewebe beschränkt ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für den Western Blot validieren Sie die Spezifität mit Phosphatase-behandelten Lysaten oder Peptid-Konkurrenz mit phosphorylierten gegenüber nicht-phosphorylierten Peptiden, um die Erkennung von Phospho-S6 zu bestätigen.
• Bei ELISA-Anwendungen erwägen Sie die Beschichtung der Platte mit einem Phospho-Peptid, das der S6-Region entspricht, um die Detektionsempfindlichkeit und Spezifität zu erhöhen.
• Angesichts der ubiquitären Expression von p53 wählen Sie geeignete Zelllinien oder Gewebeproben aus und fügen Sie bei der Lyse Phosphatase-Inhibitoren hinzu, um die Phosphorylierungssignale zu erhalten; optimieren Sie die Beladungsmengen und Antikörperverdünnungen für Ihr jeweiliges Experimentalsystem.
• Als Kaninchen-polyclonales Antikörper ist mit einem robusten Signal zu rechnen, aber überprüfen Sie die Charge-to-Charge-Konsistenz und Kreuzreaktivität in Ihrer Probenmatrix.

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