Phospho-p53-S33 Kaninchen mAb für WB, ELISA - P04637

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p53-Funktion und Lokalisierung

• Kodiert durch das TP53-Gen, ist das zelluläre Tumorantigen p53 ein Phosphoprotein, das aufgrund von alternatives Spleißen und Promotorverwendung als multiple Isoformen existiert.
• Fungiert als multifunktionaler Transkriptionsfaktor, der bei DNA-Schäden Zellzyklusarrest, DNA-Reparatur oder Apoptose induziert. Verwandte Referenzen: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Wirkt als entscheidender Tumorsuppressor durch negative Regulierung der Zellteilung via Kontrolle der Genexpression. Verwandte Referenzen: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Fördert Apoptose durch Stimulation von BAX- und FAS-Antigenexpression oder Repression von Bcl-2, wobei die Aktivität durch Interaktion mit ASPP-Proteinen moduliert wird. Verwandte Referenzen: PMID:12524540, PMID:17189187
• Lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten, einschließlich Zellkern, Zytoplasma, Mitochondrien, Zentrosom und endoplasmatischem Retikulum, was mit seinen vielfältigen regulatorischen Rollen übereinstimmt.
• Unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung an Serinen wie S33, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die Stabilität und transkriptionelle Aktivität steuern.
• Ubiquitär exprimiert mit gewebeabhängiger Isoformverteilung; bestimmte Isoformen können dominant-negative Effekte auf kanonische p53-Funktionen zeigen.
• Reguliert die circadiane Uhr durch Unterdrückung der CLOCK-BMAL1-vermittelten transkriptionellen Aktivierung von PER2. Verwandte Referenzen: PMID:24051492

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper auf die Phosphorylierung an S33 abzielt, fügen Sie Lysispuffern Phosphataseinhibitoren hinzu und bearbeiten Sie Proben auf Eis, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten.
• Für Western Blot erwägen Sie die Verwendung eines Phospho-spezifischen Blockierungsregimes und bestätigen Sie die Spezifität durch Vergleich der Signale vor und nach Phosphatasebehandlung oder Peptidkompetition.
• In ELISA: Fangen Sie Phospho-p53 in Zelllysaten ab oder detektieren Sie es; schließen Sie nicht-phosphorylierte und unbehandelte Kontrollen ein, um die Phospho-Spezifität zu validieren.
• p53 kann unter Normalbedingungen in geringer Menge vorhanden sein; Anreicherung durch Immunpräzipitation oder Behandlung mit DNA-schädigenden Agenzien kann die Detektion verbessern.

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