Phospho-p38 MAPK-T180/Y182 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q15759/P53778/O15264/Q16539

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p38 MAPK-Funktion und -Lokalisierung

• MAPK11 ist eine Serin/Threonin-Kinase und ein Mitglied der p38-Mitogen-aktivierten Proteinkinase-Familie, auch bekannt als SAPK2b oder p38-2.
• Als Teil des MAP-Kinase-Signaltransduktionsweges reagiert sie auf extrazelluläre Reize wie proinflammatorische Zytokine und physischen Stress, was zur direkten Aktivierung von Transkriptionsfaktoren führt. Verwandte Referenzen: PMID:12452429, PMID:20626350, PMID:35857590
• p38 MAPKs phosphorylieren eine breite Palette von Downstream-Zielen, einschließlich der Kinasen MSK1/2, MK2/3 und MNK1/2, die wiederum die Transkription, die mRNA-Stabilität und die Translation regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:9687510, PMID:11154262
• Im Zellkern phosphorylieren p38 MAPKs Transkriptionsfaktoren wie ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, PTPRH, DDIT3, p53, MEF2C und MEF2A, um die Genexpression zu modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10330143, PMID:15356147, PMID:9430721
• Die Kinase reguliert auch das Chromatin-Remodeling, indem sie die Phosphorylierung von Histon H3 an 'Ser-10' induziert, was die Rekrutierung von NF-kappa-B an die Promotoren entzündungsfördernder Gene verstärkt.
• Subzellulär lokalisiert sich MAPK11 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten im Gehirn und Herzen, mit zusätzlichem Vorkommen in Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung an T180 und Y182 (kritisch für die Aktivierung), und das Protein ist unter den Schlagwörtern Stressreaktion und Transkriptionsregulation klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid ist, erkennt der Antikörper spezifisch die aktivierte, doppel-phosphorylierte Form von p38 MAPK. Überprüfen Sie die Spezifität durch einen Vergleich von behandelten mit unbehandelten Zelllysaten (z. B. mit und ohne Stressinduktoren).
• Für das Western Blotting sollten Sie ein 10% SDS-PAGE-Gel verwenden und 20–30 μg Proteinlysat laden. Es können mehrere Bänder beobachtet werden, da verschiedene p38-Isoformen detektiert werden (vorhergesagte Gewichte: 29, 34, 35 und 41 kDa). Fügen Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und eine Ladungskontrolle ein.
• Bei Immunpräzipitation oder ELISA-Anwendungen bestätigen Sie die phosphospezifische Bindung unter nicht-denaturierenden Bedingungen, um die Epitop-Zugänglichkeit sicherzustellen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF-P) verwenden Sie eine Fixierungsmethode, die den Phosphorylierungsstatus erhält (z. B. 4% Paraformaldehyd) und permeabilisieren Sie mit 0,1% Triton X-100.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) erforderlich. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Verdünnung zu finden.
• Fügen Sie immer eine Negativkontrolle hinzu, indem Sie den Antikörper mit dem phosphorylierten Peptid vorabsorbieren oder durch eine Behandlung mit alkalischer Phosphatase, um die Phosphospezifität zu bestätigen.

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