Phospho-NF-κB2-S866 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q00653

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NF-κB2 (p100/p52)

• NF-κB2 kodiert die p100-Untereinheit, die durch proteolytische Prozessierung die DNA-bindende p52-Untereinheit erzeugt. p100 ist die Hauptform, während p52 die Nebenform ist, die durch nicht-kanonische NF-κB-Aktivierung erzeugt wird.
• Der NF-κB-Komplex ist ein homo- oder heterodimerer Transkriptionsfaktor, der Entzündungen, Immunität, Zellwachstum und Apoptose reguliert. p52 bildet Heterodimere mit RelB zur Aktivierung der Transkription oder Homodimere zur Repression der Transkription.
• Im nicht-kanonischen Signalweg löst die Phosphorylierung von p100 an S866 (und anderen Resten) die ubiquitinabhängige Prozessierung zu p52 aus, was die Translokation in den Kern und die Aktivierung von Zielgenen ermöglicht.
• NF-κB2 ist sowohl im Zytoplasma als auch im Kern lokalisiert; p100 hält assoziierte NF-κB-Proteine hauptsächlich im Zytoplasma zurück, während p52-Dimere nach Stimulation in den Kern wandern.
• p52 bindet an die κB-DNA-Konsensussequenz 5'-GGRNNYYCC-3' in Enhancern von Immun- und Akute-Phase-Response-Genen.
• Gemeinsam mit RELB reguliert NF-κB2 die zirkadiane Uhr, indem es die transkriptionsaktivierende Aktivität des CLOCK-BMAL1-Heterodimers reprimert.
• Das Protein ist ein Phosphoprotein mit mehreren Modifikationen; Mutationen in NFKB2 sind mit der commonen variablen Immunschwäche (CVID10) assoziiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid erhoben, das der S866 von humanem p100 entspricht, und erkennt daher NF-κB2 nur, wenn es an dieser Aminosäure phosphoryliert ist.
• Für das Western Blotting überprüfen Sie den Nachweis einer Bande von ~97 kDa (p100) und möglicherweise einer Bande von ~52 kDa (p52) in Lysaten von Zellen, die zur Aktivierung des nicht-kanonischen NF-κB-Signalwegs stimuliert wurden (z. B. mit Lymphotoxin β oder Anti-LTβR-Antikörpern).
• Da der Antikörper mit Maus-NF-κB2 kreuzreagiert, kann er für Studien in Mausmodellen geeignet sein; validieren Sie ihn jedoch in dem relevanten Gewebe oder Zelltyp.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung des Antikörpers als Capture- oder Detektionsreagenz mit geeigneten Kontrollen, um die Phosphospezifität sicherzustellen.

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