Phospho-NF-kB p65/RelA-T505 Kaninchen-pAb - Q04206

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NF-kB p65/RelA-Funktion und -Lokalisierung

• NF-kB p65/RelA ist eine Untereinheit des NF-kB-Transkriptionsfaktor-Komplexes, ein pleiotroper Regulator, der durch diverse Stimuli aktiviert wird, um Gene zu steuern, die an Entzündung, Immunität, Zellwachstum, Differenzierung, Tumorentstehung und Apoptose beteiligt sind.
• Der aktive NF-kB-Komplex kann ein Homo- oder Heterodimer aus Rel-Familienproteinen sein; das RELA-p50-Heterodimer ist die häufigste Form, das an k-B-Stellen in der Ziel-DNA bindet und als transkriptioneller Aktivator wirkt.
• Andere Mitglieder der Rel-Familie sind RELB, NFKB1 (p105/p50), NFKB2 (p52) und c-REL, wobei unterschiedliche Dimer-Kombinationen Spezifität und funktionelle Vielfalt bieten.
• In ruhenden Zellen wird NF-kB durch Wechselwirkung mit Inhibitor-I-kB-Proteinen im Zytoplasma zurückgehalten; nach Stimulation setzt die Phosphorylierung und Degradation von I-kB NF-kB für die nukleäre Translokation frei.
• RELA ist essentiell für die Zytokin-Genexpression in T-Zellen, eine Schlüsselfunktion der adaptiven Immunität. Verwandte Referenzen: PMID:15790681
• Während einer SARS-CoV-2-Infektion fungiert RELA als kritischer Transkriptionsfaktor, der die Interferonantwort reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:33440148
• Das Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen (z. B. Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung, Ubiquitinierung), die seine Aktivität, Stabilität und Wechselwirkungen modulieren.
• Die subzelluläre Lokalisierung zyklisiert zwischen Kern und Zytoplasma, wobei die Phosphorylierung an verschiedenen Stellen (einschließlich Thr505) die transkriptionelle Aktivität oder die Komplexdynamik beeinflusst.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das Thr505 abdeckt, sodass die Antikörper-Reaktivität phosphorylierungsabhängig ist. Stellen Sie sicher, dass Proben mit Phosphatase-Inhibitoren präpariert werden, um das phosphorylierte Epitop zu erhalten.
• Für den Western Blot verwenden Sie Standard-SDS-PAGE- und Transferprotokolle; die erwartete Bandengröße für phosphoryliertes RELA beträgt ~60 kDa. Optimieren Sie Blockierungs- und Antikörper-Verdünnungsbedingungen empirisch.
• Im ELISA kann die Beschichtung der Platte mit phosphoryliertem Peptid oder Proteinlysat verwendet werden; die Kreuzreaktivität mit nicht-phosphorylierten Formen sollte im experimentellen System bewertet werden.
• Dieser Antikörper ist reaktiv mit humanen Proben; für andere Spezies sollte die Sequenzhomologie um Thr505 vor der Verwendung überprüft werden.

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