Phospho-NF-kB p65/RelA-S536 Kaninchen-pAb - Q04206

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NF-kB p65/RelA-Funktion und Lokalisierung

• NF-kB p65/RelA ist eine Untereinheit des NF-kB-Transkriptionsfaktor-Komplexes, ein pleiotroper Regulator, der in fast allen Zelltypen vorkommt und Gene steuert, die an Entzündungen, Immunität, Differenzierung, Zellwachstum, Tumorentstehung und Apoptose beteiligt sind.
• Die häufigste NF-kB-Form ist das RELA-NFKB1-Heterodimer, das mit unterschiedlicher Affinität an Kappa-B-DNA-Stellen bindet; verschiedene Dimer-Kombinationen wirken als transkriptionelle Aktivatoren oder Repressoren.
• In ruhenden Zellen wird NF-kB im Zytoplasma durch IkB-Inhibitoren zurückgehalten; nach Stimulation setzt die Phosphorylierung und der Abbau von IkB NF-kB frei, ermöglicht den Kerntransport und die Aktivierung der Zielgene.
• RELA unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen – einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung –, die seine transkriptionelle Aktivität, Stabilität und Proteininteraktionen modulieren. Die Phosphorylierung an S536 innerhalb der Transaktivierungsdomäne verstärkt die transkriptionelle Ausgabe.
• Essenziell für die Zytokin-Genexpression in T-Zellen und verbrückt die angeborene und adaptive Immunantwort. Verwandte Referenzen: PMID:15790681
• Ein Schlüssel-Transkriptionsfaktor, der die Interferon-Antwort während einer SARS-CoV-2-Infektion reguliert, was seine Rolle bei der antiviralen angeborenen Immunität unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:33440148
• Die subzelluläre Lokalisierung verlagert sich dynamisch zwischen dem Kern und dem Zytoplasma, gesteuert durch Kernlokalisierungssignale und IkB-Interaktionen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren in Lyse- und Inkubationspuffern, um das S536-Phospho-Epitop zu erhalten und einen Signalverlust zu vermeiden.
• Fügen Sie bei Western-Blot-Experimenten immer einen Gesamt-NF-kB-p65-Antikörper als Ladungs- und Normalisierungskontrolle hinzu, um phosphorylierungsspezifische Änderungen zu bestätigen.
• Optimieren Sie für IHC-P die Antigen-Rückgewinnung und blockieren Sie endogene Peroxidasen; erwägen Sie eine Phosphatase-Behandlung der Schnitte, um die phosphospezifische Färbung zu verifizieren.
• Bestimmen Sie bei ELISA-Anwendungen die optimalen Antikörperverdünnungen und Nachweisbedingungen empirisch für jedes Assay-Format.

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