Phospho-NF-kB p65/RelA-S529 Kaninchen pAb für WB, ELISA - Q04206

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Transkriptionsfaktors p65

• NF-kB p65 (RELA) ist eine Untereinheit des NF-kappa-B-Transkriptionsfaktorkomplexes, die Homo- oder Heterodimere mit anderen Rel-Proteinen wie NFKB1/p50, RELB, REL und NFKB2/p52 bildet.
• Das Heterodimer RELA-NFKB1 ist der am häufigsten vorkommende Komplex, der an Kappa-B-DNA-Stellen bindet, um die Transkription von Genen zu regulieren, die an Entzündung, Immunität, Zellwachstum, Apoptose und anderen Prozessen beteiligt sind.
• RELA ist im inaktiven Zustand überwiegend zytoplasmatisch und an I-kappa-B-Inhibitoren gebunden; nach Stimulation führt die IKK-vermittelte Phosphorylierung und Degradation von I-kappa-B zur Freisetzung von RELA, das dann in den Zellkern translozieren kann.
• RELA ist essenziell für die Zytokingenexpression in T-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:15790681
• RELA ist ein zentraler Transkriptionsfaktor, der die Interferonantwort während einer SARS-CoV-2-Infektion reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:33440148
• RELA unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung, Ubiquitinierung und S-Nitrosylierung, die seine Aktivität modulieren; die Phosphorylierung an Ser529 (der Immunogenstelle) ist eines dieser regulatorischen Ereignisse.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist nach Aktivierung hauptsächlich kernständig, aber RELA shuttle auch zwischen Zellkern und Zytoplasma hin und her.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Ser529 des humanen RELA, wodurch dieser Antikörper spezifisch für die phosphorylierte Form ist. Verwenden Sie Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung, um die Phosphorsignale zu erhalten.
• Für das Western Blotting validieren Sie den Antikörper in relevanten Zelllinien oder Geweben, die zur Induktion der NF-kB-Aktivierung stimuliert wurden, und schließen Sie geeignete Kontrollen (z. B. nicht stimulierte oder mit Phosphatase behandelte Proben) ein, um die Phosphospezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit menschlichem, murinem und Ratten-RELA, sodass er über diese Spezies hinweg verwendet werden kann; überprüfen Sie jedoch die Spezifität in Ihrem Zielprobensystem.
• Für ELISA-Anwendungen wird die Optimierung der Beschichtungsbedingungen und des Nachweisbereichs für konsistente Ergebnisse empfohlen.

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