Phospho-NF-κB p105-S932 Kaninchen mAb für WB, ELISA - P19838

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NF-κB p105

• NFKB1 codiert das Vorläuferprotein p105, das proteolytisch prozessiert wird, um die aktive p50-Untereinheit des NF-κB-Transkriptionsfaktorkomplexes zu generieren (PubMed:1423592). Zugehörige Referenzen: PMID:1423592
• Die p50-Untereinheit assoziiert mit RELA/p65 zur Bildung des p65-p50-Heterodimers, der häufigsten NF-κB-Komplexform, der an κB-Stellen (5'-GGRNNYYCC-3') in Promotoren von Zielgenen bindet, um die Transkription zu aktivieren (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Zugehörige Referenzen: PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-κB ist ein pleiotroper Transkriptionsfaktor, der eine zentrale Rolle für Immunantwort, Entzündung, Apoptose und Zellproliferation spielt und wird durch IκB-Inhibitorproteine und verschiedene Stimuli reguliert.
• Das p105-Protein enthält eine N-terminale Rel-Homologiedomäne (RHD) und C-terminale Ankyrin-Wiederholungen; es fungiert als zytoplasmatisches Retentionsfaktor für NF-κB-Dimere und sequestriert sie in inaktivem Zustand.
• Nach Aktivierungssignalen phosphorylieren IκB-Kinasen (IKKs) IκB, was zu dessen Degradation und der Freisetzung von NF-κB-Dimeren führt, die anschließend in den Zellkern translozieren, um die Genexpression zu modulieren.
• p50-Homodimere wirken als transkriptionelle Repressoren, solange sie nicht mit BCL3 assoziieren – dies unterstreicht die dimerspezifische regulatorische Vielseitigkeit von NF-κB.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung, Ubiquitinierung und S-Nitrosylierung optimieren die NF-κB-Aktivität fein; die Phosphorylierung an Serinresten (z. B. S932) ist an der Prozessierung und Aktivierung von p105 beteiligt.
• Die subzelluläre Lokalisation von p105 ist überwiegend zytoplasmatisch, während aktive p50-haltige Dimere zwischen Zytoplasma und Zellkern hin- und herwandern.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um Serin932 des menschlichen NF-κB p105 entspricht. Für den Western Blot ist eine Hauptbande bei ca. 105 kDa (p105) und möglicherweise eine Bande bei ca. 50 kDa (p50) zu erwarten. Validieren Sie die Phosphorylierungsspezifität durch Behandlung von Lysaten mit Phosphatase oder den Vergleich mit einem nicht-phosphospezifischen Antikörper.
• Für ELISA-Anwendungen titrieren und optimieren Sie die Antikörperkonzentration mit phosphoryliertem Peptid oder stimulierten Zelllysaten. Fügen Sie geeignete Blockierungsschritte hinzu, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus und Ratte empfehlen sich relevante Zelllinien (z. B. Jurkat, HeLa, RAW 264.7) als Positivkontrollen. Die Induktion des NF-κB-Signalwegs mit TNF-α, LPS oder PMA/Ionomycin kann die Detektion verbessern.
• Fügen Sie aufgrund der Ähnlichkeit zwischen Mitgliedern der NF-κB-Familie immer Molekulargewichtsmarker und geeignete Kontrollen hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio unterstützt Diagnostikhersteller und Forschungseinrichtungen mit einem umfassenden Portfolio an IVD-Rohmaterialien, einschließlich hochwertiger phosphospezifischer Antikörper wie diesem NF-κB p105-S932 mAb. Mit Expertise im Bereich Entzündung und Immunsignalisierung bieten wir validierte Antikörperpaare, monoklonale/polklonale Massenantikörper und Zusatzreagenzien, um Ihre Assay-Entwicklung zu beschleunigen. Ob Sie optimierte Reagenzien für etablierte Targets benötigen oder Unterstützung bei der Beschaffung seltener Spezifitäten suchen – unsere One-Stop-Plattform schließt die Lücke zwischen Konzept und Klinik.