Phospho-Na+/K+-ATPase-S16 Kaninchen pAb für WB - P05023

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ATP1A1 (Na+/K+-ATPase-Untereinheit alpha-1) Funktion und Lokalisation

• Katalysiert den aktiven Transport von Na+ aus der Zelle und K+ in die Zelle und etabliert so elektrochemische Gradienten, die für Membranpotential, Nährstoffaufnahme und Zellvolumenkontrolle entscheidend sind. Verwandte Referenzen: PMID:29499166, PMID:30388404, PMID:35803952
• Durchläuft E1/E2-Konformationsübergänge, die durch ATP-Hydrolyse angetrieben werden, und wechselt zwischen Ionenbindung und -freisetzung, um pro Zyklus 3 Na+ nach außen und 2 K+ nach innen zu transportieren. Verwandte Referenzen: PMID:35803952
• Mitglied der P-Typ-ATPase-Familie mit zehn Transmembrandomänen und intrazellulären ATP-Bindungs- und Phosphorylierungsstellen; die alpha-1-Untereinheit ist die am häufigsten ubiquität exprimierte Isoform.
• Ist hauptsächlich an der basolateralen Membran in Epithelien, dem Sarkolemm von Muskelzellen, axonalen Projektionen und Melanosomen lokalisiert, was seiner Rolle bei dem transepithelialen Transport und der Erregbarkeit entspricht.
• Die Phosphorylierung an Ser16 (die von diesem Antikörper nachgewiesen wird) ist eine regulatorische Modifikation; das Protein ist zudem acetyliert und unterliegt alternatives Spleißen, die seine Funktion beeinflussen.
• Mutationen in ATP1A1 sind mit der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit Typ 2DD, Hypomagnesiämie, Epilepsie und geistiger Behinderung verbunden, was seine Bedeutung im Nervensystem unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper wurde gegen ein phosphoryliertes Peptid um Ser16 hergestellt und erkennt das endogene Protein voraussichtlich nur, wenn es an dieser Stelle phosphoryliert ist. Validieren Sie die Spezifität durch den Vergleich von Signalen aus phosphatasebehandelten und unbehandelten Proben.
• Für Western Blot bereiten Sie Lysate mit Phosphataseinhibitoren zu und erwägen Sie die Verwendung eines nicht-phosphorylierten Blockierpeptids zur Bestätigung der Bandenidentität.
• Im ELISA verwenden Sie das immunogene Phosphopeptid und ein nicht-phosphoryliertes Gegenstück, um die Kreuzreaktivität zu bestimmen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Human, Maus und Ratte; titrieren Sie ihn für jede Art, da die Expressionslevel unterschiedlich sein können.
• Als polyklonaler Antikörper kann es zu Chargenvariationen kommen; validieren Sie ihn bei Erhalt einer neuen Charge erneut in Ihrem Assay.

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