Phospho-MET-Y1349 Kaninchen Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P08581

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MET

• MET, auch bekannt als Hepatozyten-Wachstumsfaktor-Rezeptor (HGFR) oder c-Met, ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die aus dem MET-Gen gebildet wird; durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen.
• Als Rezeptor für Hepatozyten-Wachstumsfaktor (HGF) überträgt MET Signale, die Proliferation, Streuung, Morphogenese und Überleben regulieren. Nach Ligandenbindung autophosphoryliert es sich an Tyrosinresten einschließlich Y1349, um nachgeschaltete Effektoren zu rekrutieren.
• Phosphoryliertes MET aktiviert wichtige Signalwege wie RAS-ERK (Morphogenese), PI3K/AKT (Überleben) und PLCγ-PKC und interagiert mit Adapterproteinen wie GRB2 und GAB1.
• MET befindet sich an der Zellmembran und existiert auch in sezemierter Form; es wird weit verbreitet in Epithelzellen, Hepatozyten und Geweben wie Leber, Niere, Schilddrüse und Gehirn exprimiert, Proteinnachweis erfolgt in Knochen. Verwandte Referenzen: PMID:26637977
• Neben den normalen Funktionen bei Entwicklung und Gewebereparatur wirkt MET auch als Rezeptor für das Internalin InlB von Listeria monocytogenes, was das Eindringen des Bakteriums erleichtert.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung (Grundlage der Spezifität dieses Antikörpers) und Ubiquitinierung (Ubl-Konjugation wie in den Schlüsselwörtern angegeben).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y1349 des menschlichen MET, was eine hohe Spezifität für die phosphorylierte Form verleihen kann; validieren Sie die Spezifität durch Zugabe von nicht phosphoryliertem Peptid oder mit Phosphatase behandelten Proben im Western Blot.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 156 kDa zu erwarten; optimieren Sie die Antikörperverdünnung und Belichtungszeiten und verwenden Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Bei ELISA sollten Sie ein Phosphopeptid als Beschichtungsantigen verwenden; überprüfen Sie die Kreuzreaktivität mit Ratten-MET unter Verwendung von Zelllysaten oder rekombinanten Proteinen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Ratte ist er möglicherweise für Studien an Rattenmodellen geeignet; dennoch sollte jede Anwendung im entsprechenden Probensystem validiert werden.

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