Phospho-MEK1/MEK2-S217/S221 Kaninchen-mAk für WB, IP, ELISA - Q02750/P36507

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MEK1/MEK2-Funktion und Lokalisierung

• Die dual-spezifischen Proteinkinasen MEK1 (MAP2K1) und MEK2 (MAP2K2) sind wesentliche Bestandteile der MAPK/ERK-Signalkaskade und leiten Signale von aktiviertem RAS-RAF an ERK1/2 weiter.
• Nach Aktivierung katalysieren MEK1/2 die gleichzeitige Phosphorylierung eines Threonin- und Tyrosinrests im Thr-Glu-Tyr-Motiv von ERK1 (MAPK3) und ERK2 (MAPK1), was zu deren Aktivierung führt.
• MEK1/2 werden durch RAF-Kinasen (z.B. RAF1) stromabwärts von Wachstumsfaktor-, Zytokin- und Hormonrezeptorstimulation aktiviert und verbinden so extrazelluläre Signale mit intrazellulären Antworten.
• MEK1 fördert auch die BRAF-Aktivierung durch Bindung an KSR1- oder KSR2-Scaffold-Proteine, löst eine inhibitorische Interaktion und erleichtert die BRAF-Dimerisierung. Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Der MAPK/ERK-Signalweg reguliert verschiedene biologische Prozesse wie Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung sowie Transkription, Stoffwechsel und Umgestaltung des Zytoskeletts.
• MEK1 lokalisiert im Zytoplasma, Zytoskelett (Zentrosom, Spindelpol), Zellkern und an der Membran; MEK2 zeigt eine ähnliche Verteilung.
• MEK1 ist weit verbreitet exprimiert, mit extrem niedrigen Spiegeln im Gehirn. MEK2 weist ein ähnlich breites Expressionsmuster auf.
• MEK1/2 sind Phosphoproteine und Serin/Threonin/Tyrosin-Kinasen; die Phosphorylierung von MEK1 an Ser217 und Ser221 ist ein Schlüsselaktivierungsereignis.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das auf phosphoryliertes Ser217 und Ser221 abzielt; der Antikörper soll spezifisch die doppelt phosphorylierte aktive Form von MEK1/2 erkennen.
• Für Western Blot erscheinen MEK1/2 als Banden um 40–44 kDa. Verwenden Sie geeignete positive Kontrollen (z.B. EGF-stimulierte Zelllysate) und setzen Sie Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung ein.
• Für die Immunpräzipitation bietet ein Kaninchen-monoklonaler Antikörper hohe Spezifität und Kompatibilität mit Standard-IP-Protokollen. Validieren Sie die Pull-Down-Effizienz mit Phospho-ERK1/2-Nachweisen.
• Dieser Antikörper ist für ELISA geeignet; ziehen Sie eine Beschichtung mit dem Phosphopeptid oder ein Sandwich-Format zum Nachweis von phosphoryliertem MEK1/2 in Zelllysaten in Betracht.

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