Phospho-MEK1-T292 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q02750

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MEK1-Funktion und -Lokalisierung

• MEK1 (MAP2K1), auch bekannt als PRKMK1, MKK1, ist eine 43 kDa duale spezifische Mitogen-aktivierte Proteinkinase-Kinase, die als essentielle Kinase im RAS-RAF-MEK-ERK-Signaltransduktions-Kaskade dient.
• Nach Aktivierung durch RAF1 phosphoryliert MEK1 sowohl einen Threonin- als auch einen Tyrosinrest innerhalb des Thr-Glu-Tyr-Motivs von ERK1 (MAPK3) und ERK2 (MAPK1), was zu ihrer Aktivierung und nachgelagerten Signalereignissen führt, die Zellwachstum, Adhäsion, Überleben, Differenzierung, Transkription, Stoffwechsel und zytoskelettale Umordnungen regulieren.
• Auf eine KSR1- oder KSR2-abhängige Weise aktiviert MEK1 auch BRAF durch die Freisetzung hemmender intramolekularer Wechselwirkungen und die Förderung der BRAF-Dimerisierung. Verwandte Referenzen: PM:29433126
• MEK1 ist am nuklearen Export des Peroxisom-Proliferator-aktivierten Rezeptors gamma (PPARG) beteiligt und nimmt an der Regulation der Endosomdynamik teil, einschließlich der Lysosomenverarbeitung, des Endosomzyklus durch das perinukleäre Recycling-Kompartiment (PNRC) und der Fragmentation des Golgi-Apparats während der Mitose.
• Das Protein lokalisiert sich in mehrere subzelluläre Kompartimente, einschließlich Zytoplasma, Zytoskelett (Zentrosom und Spindelpolkörper), Zellkern und Membran, was seinen vielfältigen funktionellen Rollen entspricht.
• MEK1 ist in verschiedenen Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei im Gehirn extrem niedrige Spiegel nachgewiesen wurden.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung an Threonin 292 (und anderen Stellen), Acetylierung und alternatives Spleißen regulieren ihre Aktivität und Wechselwirkungen. Mutationen in MAP2K1 sind mit Krankheiten wie Kardiomyopathie, ektodermaler Dysplasie und intellektueller Behinderung (Noonan-Syndrom-Spektrumstörungen) assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um T292 von humanem MEK1; dieser Antikörper ist darauf ausgelegt, spezifisch die phosphorylierte Form zu erkennen. Behandeln Sie Zellen mit entsprechenden Stimuli (z. B. Wachstumsfaktoren) und fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren den Lysepuffern hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 43 kDa erwartet. Verwenden Sie ein reduzierendes SDS-PAGE-Gel und validieren Sie den Nachweis mit positiven und negativen Kontrollen (z. B. phosphatasebehandelte Lysate oder Blockierung mit nicht-phosphoryliertem Peptid).
• Es wurde gezeigt, dass der Antikörper in WB- und ELISA-Anwendungen funktioniert. Er erkennt sowohl menschliches als auch Ratten-MEK1. Erwägen Sie die Optimierung der Antikörperverdünnung für Ihre spezifischen Proben und Nachweissysteme.
• Bei der Bewertung der Phosphorylierungsdynamik von MEK1 können Zeitverlaufsexperimente und Pathway-Inhibitoren (z. B. MEK-Inhibitoren) helfen, die Spezifität zu bestätigen.

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