Phospho-MEK1-T292 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, ELISA - Q02750

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MEK1-Funktion und -Lokalisierung

• MEK1 (MAP2K1) ist eine duale Proteinkinase, die für den MAPK/ERK-Signalweg essentiell ist. Sie katalysiert die Phosphorylierung von Threonin- und Tyrosinresten in ERK1/2 (MAPK3/1), um downstream-Signale weiterzuleiten.
• Sie wirkt stromabwärts von RAS und RAF1 und überträgt Signale von Wachstumsfaktoren, Zytokinen und Hormonen, um Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung zu steuern.
• MEK1 fördert auch die BRAF-Aktivierung durch Assoziation mit den Gerüstproteinen KSR1 oder KSR2, ein Mechanismus, der die Autoinhibition lindert und die Dimerisierung verbessert. Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Das Protein lokalisiert sich an mehrere subzelluläre Orte, einschließlich Zytoplasma, Zentrosom, Spindelpol, Kern und Membran, was seine Beteiligung an verschiedenen Signalzusammenhängen und der Mitose erleichtert.
• MEK1 ist weit verbreitet exprimiert, mit sehr geringer Häufigkeit im Gehirn, was seiner ubiquitären Rolle bei der Regulierung grundlegender zellulärer Prozesse entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung (z. B. bei Thr292) und Acetylierung steuern die MEK1-Aktivität fein, und Mutationen werden mit Kardiomyopathie, ektodermaler Dysplasie und geistiger Behinderung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um Thr292 von humanem MEK1 (UniProt Q02750) entspricht. Für Western Blots sollten Sie Phosphatase-Inhibitoren zu den Zelllysepuffern hinzufügen, um phosphorylierungsabhängige Signale aufrechtzuerhalten.
• Bei ELISA kann die Antigenbeschichtung mit dem phosphorylierten Peptid eine Optimierung des Beschichtungspuffers und der Blockierungsbedingungen erfordern, um die Phospho-Spezifität sicherzustellen.
• Angesichts der hohen Konservierung von MEK1 bei Mensch, Maus und Ratte wird erwartet, dass dieser Antikörper die phosphorylierte Form in allen drei Spezies nachweist; die Kreuzreaktivität sollte jedoch experimentell in den relevanten Spezies und Gewebe-/Zelltypen bestätigt werden.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 43 kDa. Validieren Sie die Bandengröße mit geeigneten Phosphostellen-Kontrollen (z. B. Lambda-Phosphatase-Behandlung), um die Spezifität zu bestätigen.
• Da es sich um einen phosphospezifischen Antikörper handelt, ist die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz für quantitative Anwendungen wie ELISA entscheidend. Wir empfehlen Titration und parallele Tests mit nicht-phosphorylierten Peptidkontrollen, um Variabilität zu minimieren.

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