Phospho-MEK1-T286 Kaninchen pAb - Q02750

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MEK1

• Dualspezifische Proteinkinase, die ein essenzieller Bestandteil des MAP-Kinase-Signaltransduktionswegs ist. Sie katalysiert die gleichzeitige Phosphorylierung eines Threonin- und eines Tyrosinrests in ERK1/2 (MAPK3/1) an einer Thr-Glu-Tyr-Sequenz, was zu deren Aktivierung führt.
• Vermittelt vielfältige biologische Funktionen wie Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung, vorwiegend durch Regulierung von Transkription, Stoffwechsel und zytoskelettalen Umstrukturierungen.
• In der MAPK/ERK-Kaskade aktiviert RAF1 MAP2K1/MEK1, das anschließend ERK1/2 phosphoryliert und aktiviert.
• Aktiviert BRAF auf KSR1- oder KSR2-abhängige Weise, löst hemmende intramolekulare Interaktionen in KSR-Proteinen und fördert die KSR-BRAF-Dimerisierung sowie die BRAF-Aktivierung. Zugehörige Referenzen: PMID:29433126
• Exportiert den Peroxisom-Proliferator-aktivierten Rezeptor Gamma (PPARG) aus dem Zellkern und beeinflusst so Differenzierung und Apoptose.
• Beteiligt an der Regulierung der endosomalen Dynamik, einschließlich Lysosombearbeitung und Endosomenzyklus, sowie an der Fragmentierung des Golgi-Apparats während der Mitose.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zentrosom, Spindelpol, Zellkern und Membran.
• Wird breit in Geweben exprimiert, mit extrem niedrigen Gehalten im Gehirn.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Threonin 286 des humanen MEK1 erzeugt; er wird voraussichtlich MEK1 nur erkennen, wenn es an T286 phosphoryliert ist.
• Um die Phosphorylierung zu erhalten, verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern und vermeiden Sie längere Probenhandhabung bei Raumtemperatur.
• Validierte Anwendungen umfassen Western Blot (WB) und ELISA; für WB ist eine Bande bei ca. 43 kDa zu erwarten. Kreuzreaktivität wurde mit humanem, Maus- und Ratten-MEK1 beobachtet.
• Erwägen Sie eine Validierung des Antikörpers in Ihrer Zelllinie oder Ihrem Zielgewebe unter stimulierten (z. B. mit Wachstumsfaktoren behandelten) gegenüber unstimulierten Bedingungen, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper, um optimale Beschichtungs- und Nachweisbedingungen zu bestimmen; kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Fangantikörper, wenn Sie einen Sandwich-Assay entwickeln.

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