Phospho-MDM2-S260 Kaninchen-pAb für WB, ELISA - Q00987

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MDM2-Funktion und -Lokalisierung

• MDM2 ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die hauptsächlich p53/TP53 für die Ubiquitinierung und den proteasomalen Abbau zielt und so die p53-vermittelte Zellzyklusarrest und Apoptose hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:29681526
• Sie ubiquitiniert auch andere Substrate, einschließlich IGF1R, SNAI1, DYRK2 und DCX, und reguliert Prozesse wie den Rezeptorabbau, die neuronale Entwicklung und die Zellmigration. Verwandte Referenzen: PMID:12821780, PMID:15053880, PMID:15195100
• MDM2 reguliert NDUFS1 negativ, was zu einer verringerten mitochondrialen Atmung, erhöhtem oxidativen Stress und einer Einleitung des mitochondrialen Apoptosewegs führt. Verwandte Referenzen: PMID:30879903
• Subzellulär kommt MDM2 im Kern, Nukleoplasma, Zytoplasma und Nukleolus vor und wechselt zwischen den Kompartimenten, um ihre vielfältigen Funktionen auszuüben.
• MDM2 ist ein Phosphoprotein mit einer RING-Typ-Zinkfingerdomäne; die Phosphorylierung an mehreren Stellen, einschließlich S260, kann ihre Aktivität, Stabilität und Wechselwirkungen mit p53 und anderen Partnern modulieren.
• Gewebespezifisch wird MDM2 ubiquitär exprimiert, aber bestimmte Spleiß-Isoformen (Mdm2-A bis -G) werden in einer Reihe von Krebsarten beobachtet, fehlen jedoch in normalen Geweben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Verwenden Sie während der Probenvorbereitung Phosphatasehemmer, um die Phosphorylierung bei S260 zu erhalten.
• Für WB sollten Sie die Blockierung mit einem nicht-phosphorylierten Peptid in Betracht ziehen oder Proben mit Phosphatase behandeln, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Validieren Sie den Antikörper in menschlichen Zelllinien oder Geweben mit bekannter MDM2-Expression und Phosphorylierungsstatus (z. B. Krebszellen mit Wildtyp-p53 unter genotoxischem Stress).
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass das Erfassungs- und Nachweisesystem das phosphorylierte Epitop erhält, und vermeiden Sie längere Inkubationen, die zu einer Dephosphorylierung führen können.

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