Phospho-MDM2-S166 Kaninchen-mAk für IHC-P und ELISA - Q00987

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MDM2-Funktion und Lokalisierung

• MDM2 ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die die Ubiquitinierung von p53/TP53 vermittelt, was zu dessen proteasomalem Abbau und der Hemmung des p53- und p73/TP73-vermittelten Zellzyklusarrests und der Apoptose führt.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:29681526
• Es ubiquitiniert auch andere Tumorsuppressoren und Signalproteine und fördert deren Abbau, einschließlich RB1, DAXX, IGF1R und SNAI1.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:12821780
  PMID:15053880
  PMID:15195100
• MDM2 reguliert die mitochondriale Atmung negativ, indem es NDUFS1 bindet, was zu dessen zytosolischer Retention, reduzierter Komplex-I-Aktivität, oxidativem Stress und Apoptose führt.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:30879903
• Vorwiegend im Zellkern (Nukleoplasma und Nukleolus) lokalisiert, mit zusätzlicher zytoplasmatischer Verteilung.
• Ubiquitär in normalen Geweben exprimiert; krebs-spezifische Isoformen (Mdm2-A bis Mdm2-G) werden in einer Reihe von Malignomen nachgewiesen.
• Die Phosphorylierung an Serin 166 und anderen Resten reguliert die MDM2-Aktivität und Protein-Protein-Interaktionen.
• Enthält eine RING-Typ-Zinkfinger-Domäne und gehört zur Familie der Ubiquitin-konjugierenden Enzyme; benötigt Zink für seine E3-Ligase-Funktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein Phospho-synthetisches Peptid um S166 hergestellt; er erkennt spezifisch die phosphorylierte Form von MDM2. Validieren Sie den Phosphorylierungsstatus mit Phosphatase-Behandlungskontrollen.
• Für IHC-P: Antigen-Retrieval (z.B. Citratpuffer) in Betracht ziehen und die Färbeintensität in Gewebeproben validieren, von denen bekannt ist, dass sie erhöhte Phospho-MDM2-Spiegel aufweisen (z.B. bestimmte Tumore).
• Für ELISA: Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnung durch Schachbrett-Titration optimieren und sowohl phosphorylierte als auch nicht-phosphorylierte Peptidkontrollen einschließen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; verifizieren Sie das Signal in Proben der relevanten Spezies unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen.

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