Phospho-MCL1-T163 Kaninchen pAb für WB, ELISA - Q07820

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MCL1-Funktion und Lokalisierung

• MCL1 (Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1, auch bekannt als Bcl2-L-3) ist ein anti-apoptotisches Mitglied der Bcl-2-Familie, das für das Zellüberleben entscheidend ist.
• Alternatives Spleißen erzeugt überlebensfördernde (Isoform 1) und pro-apoptotische (Isoform 2) Varianten, die die Apoptoseregulation ausbalancieren.
• Kernfunktion: Hemmt Apoptose, indem es pro-apoptotische Mitglieder der Bcl-2-Familie bindet und neutralisiert, und erhält so die Zellviabilität, ohne die Proliferation zu fördern.
• Subzelluläre Lokalisierung: Befindet sich im Zytoplasma, in Mitochondrien, im Zellkern und in der Membran; translokiert zu Mitochondrien, um seine anti-apoptotische Wirkung zu entfalten.
• Posttranslationale Modifikationen: Phosphorylierung an mehreren Stellen (einschließlich T163) reguliert die Proteinstabilität und die anti-apoptotische Aktivität; unterliegt auch Ubiquitinierung und Isopeptidbindungsbildung.
• Schlüsselwörter: Phosphoprotein, alternatives Spleißen, Apoptose, Differenzierung, mitochondriale Membran, Transmembranhelix, Entwicklungsprotein.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Regionen um T163 von humanem MCL1 entspricht. Bestätigen Sie die Spezifität durch Vergleich der Signale von Phosphatase-behandelten und unbehandelten Proben im WB.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 37 kDa. Erwägen Sie die Verwendung eines phospho-spezifischen Protokolls mit BSA-basiertem Blockieren, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Validieren Sie die Antikörperreaktivität sowohl in humanen als auch in murinen Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie MCL1 exprimieren; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet.
• Verwenden Sie in ELISA ein phosphoryliertes Peptid als Beschichtungsantigen und ein nicht-phosphoryliertes Peptid als Negativkontrolle, um eine phospho-spezifische Bindung sicherzustellen.

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