Phospho-MAP2K4-S257 Kaninchen pAb für Western Blot, ELISA - P45985

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MAP2K4

• Proteinkinase mit doppelter Spezifität, die als essenzieller Bestandteil des MAP-Kinase-Signaltransduktionswegs wirkt.
• Essenzieller Bestandteil des stressaktivierten Proteinkinase/c-Jun N-terminalen Kinase (SAP/JNK) Signalwegs; phosphoryliert und aktiviert direkt MAPK8/JNK1, MAPK9/JNK2 und MAPK10/JNK3.
• Zusammen mit MAP2K7/MKK7 ist sie eine der einzigen bekannten Kinasen, die JNKs direkt aktivieren; MAP2K4 phosphoryliert bevorzugt den Tyr-Rest innerhalb des Thr-Pro-Tyr-Motivs.
• Aktiviert darüber hinaus p38 MAPKs (MAPK11, MAPK12, MAPK13, MAPK14), im Gegensatz zu MAP2K7, das ausschließlich JNKs als Ziel hat.
• Erforderlich für die Erhaltung der peripheren lymphoiden Homöostase.
• Beteiligt an der mitochondrialen Todessignalisierung, fördert die Freisetzung von Cytochrom c und Apoptose.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst sowohl Zytoplasma als auch Zellkern.
• Wird reichlich in der Skelettmuskulatur exprimiert, mit einer breiten Verteilung in anderen Geweben.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Bestätigen Sie die Phospho-Spezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase oder durch Co-Inkubation mit nicht phosphoryliertem Blocking-Peptid.
• Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrolllysate hinzu (z. B. stimulierte versus nicht stimulierte Zellen), um das Phospho-Signal im WB zu validieren.
• Überprüfen Sie bei Maus- oder Rattenproben die Kreuzreaktivität und Sequenzausrichtung an der Phosphorylierungsstelle vor quantitativen Assays.
• Bestimmen Sie die optimale Antikörperverdünnung für jede Anwendung experimentell; typische Startverdünnungen finden Sie im Antikörperdatenblatt.
• Sorgen Sie im ELISA für eine konsistente Plattenbeschichtung und Detektionsreagenzien, um Variabilität bei der Phospho-Quantifizierung zu minimieren.

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