Phospho-MAP2K1-S217/MAP2K2-S221 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q02750 / P36507

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MAP2K1/MAP2K2 (MEK1/MEK2) Funktion und Lokalisierung

• MAP2K1 (MEK1) und MAP2K2 (MEK2) sind dual-spezifische Proteinkinasen, die als wesentliche Komponenten des MAP-Kinase-Signaltransduktionsweges, speziell der MAPK/ERK-Kaskade, dienen.
• Nach extrazellulärer Stimulation aktiviert RAS RAF1, das wiederum MAP2K1/2 an konservierten Serinresten (S217 in MEK1, S221 in MEK2) phosphoryliert und aktiviert, was die nachgeschaltete Phosphorylierung von ERK1/2 an einem Thr-Glu-Tyr-Motiv auslöst.
• Aktivierte ERK1/2 wandern dann in den Zellkern, um Transkriptionsfaktoren zu regulieren und Prozesse wie Zellwachstum, Adhäsion, Überleben, Differenzierung, Stoffwechsel und Umgestaltung des Zytoskeletts zu steuern.
• MAP2K1 ist auch an der KSR1/2-abhängigen BRAF-Aktivierung beteiligt, indem es die KSR-BRAF-Dimerisierung fördert, was hemmende Wechselwirkungen aufhebt und die BRAF-Kinaseaktivität verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Die MAPK/ERK-Kaskade beeinflusst die endosomale Dynamik, Lysosomenverarbeitung und Golgi-Fragmentierung während der Mitose, vermittelt teilweise durch die subzelluläre Lokalisierung von MAP2K1 im Zytoplasma, Zentrosom, Spindelpol, Zellkern und an der Membran.
• MAP2K1 ist in menschlichen Geweben weit verbreitet exprimiert, zeigt jedoch extrem niedrige Spiegel im Gehirn, was zu seiner ubiquitären Rolle in der mitogenen Signalübertragung passt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an Aktivierungsstellen, Acetylierung und krankheitsassoziierte Mutationen, die mit Kardiomyopathie, ektodermaler Dysplasie und intellektueller Beeinträchtigung in Verbindung gebracht werden (laut UniProt-Schlüsselwörtern).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das S217 von MAP2K1 und S221 von MAP2K2 umfasst, was darauf hindeutet, dass der Antikörper bevorzugt die aktivierten (phosphorylierten) Formen von MEK1/2 erkennt.
• Für Western Blot: Bereiten Sie Lysate aus serum-ausgehungerten Zellen, die mit Wachstumsfaktoren (z.B. EGF, Insulin) stimuliert wurden, zu, um eine robuste MEK1/2-Phosphorylierung zu induzieren; validieren Sie die Spezifität durch Vergleich mit Gesamt-MEK1/2-Antikörpern oder durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase.
• Die erwarteten Molekulargewichte sind ~40–44 kDa für MAP2K1 und ~45 kDa für MAP2K2; alternatives Spleißen kann zusätzliche Banden ergeben.
• In ELISA kann der Antikörper als Einfang- oder Nachweisreagenz verwendet werden, aber optimale Verdünnung und Paarung sollten empirisch im endgültigen Assaysystem bestimmt werden.

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