Phospho-Lck-Y505 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P06239

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Lck-Funktion und -Lokalisierung

• Tyrosin-Proteinkinase Lck (p56-LCK) ist eine nicht-rezeptorgebundene Tyrosinkinase der Src-Familie, die für die Auswahl und Reifung sich entwickelnder T-Zellen im Thymus und für die Funktion reifer T-Zellen unerlässlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• Lck spielt eine Schlüsselrolle bei der mit dem T-Zell-Antigenrezeptor (TCR) verknüpften Signaltransduktion. Sie ist konstitutiv mit den cytoplasmatischen Schwänzen der CD4- und CD8-Corezeptoren assoziiert und phosphoryliert nach TCR-Engagement ITAM-Motive im TCR-CD3-Komplex, was die Signalisierung einleitet. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• Sobald sie aktiviert ist, phosphoryliert und aktiviert Lck die downstream-Kinase ZAP70, was zur Rekrutierung von Signalmolekülen und Lymphokinproduktion führt. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• Lck trägt auch zur Signalübertragung über andere Rezeptoren bei, einschließlich CD2-vermittelter Hyperphosphorylierung und dem IL2-Rezeptorweg, der die T-Zell-Proliferation steuert. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• Zusätzliche Substrate von Lck umfassen RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH und TYROBP, und es interagiert mit FYB2. Verwandte Referenzen: PMID:27335501
• Lck lokalisiert in der Zellmembran und im Cytoplasma (Cytosol) und wird spezifisch in lymphoiden Zellen exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-terminale Myristoylierung und Palmitoylierung für die Membranverankerung sowie regulatorische Phosphorylierung an wichtigen Tyrosinen, einschließlich Y505 (inhibitorisch). Sie enthält SH2- und SH3-Domänen und wird als Proto-Onkogen und Kinase klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wird gegen ein synthetisches Phosphopeptid erhoben, das dem Y505-Bereich von humanem Lck entspricht; er ist darauf ausgelegt, spezifisch Lck zu erkennen, das bei Y505 phosphoryliert ist.
• Für Western Blot (WB) sollten Sie Zell- oder Gewebelysate von menschlichen T-Zelllinien (z. B. Jurkat) mit geeigneten Phosphatase-Inhibitoren verwenden, um die Phosphorylierung zu erhalten. Eine Bande um 58 kDa wird erwartet.
• Für die Immunpräzipitation (IP) ist möglicherweise eine Optimierung der Antikörperkonzentration und der Lysepufferbedingungen erforderlich; verifizieren Sie die eluierten Proteine per WB.
• In ELISA kann der Antikörper verwendet werden, um Phospho-Lck-Y505 in peptidbasierten Assays nachzuweisen; Beschichtungs- und Nachweisbedingungen sollten empirisch ermittelt werden.
• Validieren Sie den Antikörper immer im relevanten Probensystem und Anwendungskontext, da die Leistung unter experimentellen Bedingungen variieren kann.

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