Phospho-LCK-Y394 Kaninchen pAb - P06239

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: LCK Funktion und Lokalisation

• LCK ist eine nicht-Rezeptor-Tyrosin-Proteinkinase, die essenziell für die T-Zell-Selektion und -Reifung im Thymus sowie die Funktion reifer T-Zellen ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• Nach Bindung des T-Zell-Rezeptors (TCR) an Peptid-MHC wird LCK zum TCR-CD3-Komplex rekrutiert und phosphoryliert Tyrosinreste innerhalb der ITAMs von CD3- und TCR-Ketten, was die Rekrutierung von ZAP70 und nachgeschaltete Lymphokinproduktion auslöst.
  Verwandte Referenzen: PMID:2470098 PMID:40592325
• LCK ist auch an der Signalgebung über CD2- und IL2-Rezeptoren beteiligt: Die Assoziation mit CD2 führt zur Hyperphosphorylierung von LCK, und die Bindung von IL2 verstärkt die LCK-Aktivität, um die T-Zell-Proliferation zu fördern.
• Es phosphoryliert mehrere Substrate darunter RUNX3, PTK2B/PYK2, MAPT, RHOH und TYROBP und interagiert mit FYB2.
  Verwandte Referenzen: PMID:27335501
• Lokalisiert an der Zellmembran, im Zytoplasma und im Zytosol.
• Wird spezifisch in lymphoiden Zellen exprimiert.
• Es ist mit Schlagwörtern wie alternatives Spleißen, ATP-Bindung, Kinase, Phosphoprotein, Proto-Onkogen, SH2- und SH3-Domänen sowie Lipidierung (Myristat und Palmitat) annotiert, was seine facettenreiche Regulation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um Tyr394, daher wird erwartet, dass der Antikörper spezifisch LCK erkennt, das an dieser Aktivierungsschleifen-Stelle phosphoryliert ist.
• Für WB verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung, um die Phosphorylierung zu erhalten. In Lysaten lymphoider Zellen von Mensch und Maus wird eine Bande bei ~58 kDa erwartet.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in geeigneten T-Zell-Modellen (z. B. Jurkat-Zellen), die über CD3/CD28 stimuliert wurden, um eine starke Tyr394-Phosphorylierung zu induzieren.
• Für IF/ICC kann eine optimierte Fixierung/Permeabilisierung erforderlich sein; erwägen Sie Tests in aktivierten T-Zellen oder Thymusgewebeschnitten.

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