Phospho-LAT-Y171 Kaninchen pAb für WB und ELISA - O43561

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LAT-Funktion und Lokalisierung

• LAT (Linker for activation of T-cells) ist ein 36–38 kDa großes transmembranes Adapterprotein, das für die Kopplung der Antigenrezeptor-Bindung an nachgeschaltete Signalkaskaden essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:23514740 PMID:25907557
• Es fungiert nach TCR-Stimulation als zentrales Gerüst, rekrutiert PLCG1, GRB2, GRAP2 und andere Moleküle, um den Calciumfluss, die MAPK-Aktivierung und die Reorganisation des Zytoskeletts voranzutreiben.
• Über T-Zellen hinaus wirkt LAT bei der FCGR3-vermittelten Signalübertragung natürlicher Killerzellen und der FCER1-vermittelten Degranulation von Mastzellen, was seine Rolle in mehreren Immun-Effektorwegen unterstreicht.
• Das Protein wird über eine einzelne Transmembranhelix in der Zellmembran lokalisiert und unterliegt Lipidmodifikationen wie Palmitoylierung, die für die Zielsteuerung zu Lipid Rafts und die Bildung von Signalmikroclustern entscheidend sind.
• Umfangreiche Tyrosinphosphorylierung – insbesondere an Y171 – dient als Andockstelle für GRB2-Familien-Adapter, was es zu einem zentralen Knotenpunkt im TCR-Signalosom macht.
• Beim Menschen wird LAT hauptsächlich im Thymus, in T-Zellen, NK-Zellen und Mastzellen exprimiert, mit schwacher Expression in der Milz; in B-Zellen ist es nicht nachweisbar.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein phosphoryliertes Peptid um Tyrosin 171 hergestellt; verwenden Sie geeignete Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Für den Western Blot sollten Sie eine Kontrolle mit nicht-phosphoryliertem Peptid als Blockierkontrolle einschließen, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen, und den Nachweis in stimulierten vs. ruhenden T-Zelllysaten validieren (z.B. Jurkat-Zellen ± anti-CD3).
• Im ELISA kann das synthetische Phosphopeptid-Immunogen als Festphasen-Antigen dienen; ziehen Sie in Betracht, eine nicht-phosphorylierte Variante zum Abzug der Hintergrundreaktivität zu verwenden.
• Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht nachgewiesen; validieren Sie die Reaktivität im beabsichtigten Probensystem vor dem routinemäßigen Einsatz.

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