Phospho-Lamin A/C-S22 Kaninchen pAb für WB, IP, ELISA - P02545

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Prelamin-A/C-Funktion und Lokalisierung

• Lamina sind Typ-V-Intermediärfilamentproteine, die die Kernlamina bilden, strukturelle Unterstützung für die Kernhülle bieten, Chromatin organisieren und Kernporenkomplexe verankern und somit eine entscheidende Rolle bei der Kernassemblierung und -dynamik spielen. Verwandte Referenzen: PMID:10080180 PMID:10580070 PMID:10587585
• Lamin A und C regulieren die Matrixsteifigkeit, indem sie dem Zellkern mechanische Eigenschaften verleihen und die zelluläre Mechanotransduktion beeinflussen. Verwandte Referenzen: PMID:23990565 PMID:25127216
• Die Kernlamina durchläuft einen zellzyklusabhängigen Abbau und Wiederaufbau; die Phosphorylierung an Ser22 ist ein Schlüsselereignis, das den Laminaabbau während der Mitose antreibt, während die Dephosphorylierung den Wiederaufbau in der Telophase ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:2188730 PMID:2344612
• Lamin A/C wird durch XRCC4 und IFFO1 an DNA-Doppelstrangbrüche rekrutiert, immobilisiert gebrochene DNA-Enden und verhindert so Chromosomentranslokationen. Verwandte Referenzen: PMID:31548606
• Erforderlich für die normale Entwicklung des peripheren Nervensystems und der Skelettmuskulatur sowie für die Proliferation von Muskel-Satellitenzellen. Verwandte Referenzen: PMID:10080180 PMID:10814726 PMID:11799477
• Essentiell für die Osteoblastogenese und Knochenbildung und verhindert die Fettinfiltration von Muskel und Knochenmark. Verwandte Referenzen: PMID:12075506 PMID:15317753 PMID:18611980 PMID:10587585
• In vaskulären glatten Muskelzellen beschleunigt die Akkumulation von Prelamin-A/C die Seneszenz durch Störung der Mitose und Induktion von DNA-Schäden. Verwandte Referenzen: PMID:20458013
• Subzelluläre Lokalisierung: Befindet sich in der Kernlamina, Kernhülle, im Nukleoplasma, der Kernmatrix und nukleären Speckles.
• Gewebespezifität: In Arterien nimmt die Prelamin-A/C-Expression mit Alter und Krankheit zu und kolokalisiert mit seneszenten VSMCs in atherosklerotischen Läsionen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein phosphoryliertes Peptid ist, erkennt der Antikörper spezifisch die Phosphorylierung an Ser22; verwenden Sie Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung, um diese Modifikation zu erhalten.
• Für Western Blotting wird ein Proteinband bei etwa 74 kDa erwartet; ziehen Sie die Verwendung eines 8–12% SDS-PAGE-Gels für eine optimale Trennung in Betracht und bestätigen Sie dies mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern.
• Angesichts der zellzyklusabhängigen Phosphorylierung von Lamina kann das Detektionssignal variieren; ziehen Sie in Betracht, Zellen zu synchronisieren oder Proben in definierten mitotischen Stadien zu sammeln, um das Signal zu maximieren.
• Der Antikörper ist für Human- und Rattenproben validiert, die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte jedoch experimentell überprüft werden; für IP wird die Prüfung unter nativen und denaturierenden Bedingungen empfohlen.
• Als polyklonaler Antikörper vom Kaninchen kann er Charge-zu-Charge-Variabilität aufweisen; titrieren und validieren Sie ihn immer in Ihrer spezifischen Anwendung.

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