Phospho-JAK2-Y1008 Kaninchen-pAk für WB, ELISA - O60674

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: JAK2-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität und -familie: Tyrosin-Proteinkinase JAK2 (Januskinase 2) ist eine nicht-rezeptorgebundene Proteintyrosinkinase, die eine zentrale Rolle in der Zytokin- und Wachstumsfaktor-Signalgebung spielt. Sie enthält eine Kinasedomäne, eine Pseudokinasedomäne und eine SH2-Domäne und wird durch Autophosphorylierung an Schlüsselresten einschaktiviert Y1008. Verwandte Referenzen: PMID:7615558
• Signaltransduktionsmechanismus: Nach der Ligandenbindung an Typ-I- oder Typ-II-Zytokinrezeptoren phosphoryliert JAK2 spezifische Tyrosinreste an den zytoplasmatischen Enden der Rezeptoren und schafft so Andockstellen für STAT-Transkriptionsfaktoren. Anschließend phosphoryliert JAK2 STATs, die dimerisieren und in den Zellkern translozieren, um die Genexpression zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:15690087, PMID:9618263
• Regulation der Erythropoese: JAK2 ist essentiell für die Erythropoietin-(EPO)-Signalgebung. Die EPO-Bindung induziert die JAK2-Autophosphorylierung und -aktivierung, was zur Phosphorylierung von EPOR, der Rekrutierung von STAT5 und der Aktivierung von Genen führt, die für die Erythropoese erforderlich sind. Verwandte Referenzen: PMID:9657743
• Chromatinmodifikator: Im Zellkern phosphoryliert JAK2 Histon H3 an Tyrosin-41 (H3Y41ph), wodurch das Heterochromatin-Protein HP1α (CBX5) vom Chromatin verdrängt wird, was wiederum die Genexpression und die Chromatinstruktur beeinflusst. Verwandte Referenzen: PMID:19783980
• Subzelluläre Lokalisierung: JAK2 findet sich im Zytoplasma, assoziiert mit dem endomembranösen System, und im Zellkern, was seine vielfältigen Rollen in der Signaltransduktion und nukleären Ereignissen widerspiegelt.
• Ubiquitäre Expression: JAK2 ist in den meisten Geweben ubiquitär exprimiert, was seinen grundlegenden Rollen im Zellwachstum, der Differenzierung und der Immunität entspricht.
• Andere wichtige Wechselwirkungen: JAK2 kooperiert mit der TEC-Kinase, moduliert CDKN1B zur Regulierung des Zellzyklus und beteiligt sich an den Onkostatin-M- und CNTF-Signalwegen. Verwandte Referenzen: PMID:21423214, PMID:9188471, PMID:11294841
• Krankheitsrelevanz: Als Proto-Onkogen sind Gain-of-Function-Mutationen von JAK2 (z. B. V617F) mit myeloproliferativen Erkrankungen assoziiert. Schlagworte verknüpfen es ebenfalls mit adaptiver und angeborener Immunität, chromosomaler Umordnung und Ubiquitin-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Autophosphorylierungsort Y1008 umfasst. Dieser Ort ist kritisch für die JAK2-Kinaseaktivierung; stellen Sie sicher, dass die Nachweis den Phosphorylierungsstatus Ihres Ziels widerspiegelt, indem Sie geeignete Kontrollen einbeziehen (z. B. λ-Phosphatase-Behandlung).
• Western Blot wird empfohlen; das vorhergesagte Molekulargewicht von JAK2 beträgt 131 kDa. Verwenden Sie einen frischen Blockierungspuffer und überprüfen Sie die Bandspezifität durch Wettbewerb mit dem nicht-phosphorylierten Peptid.
• Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit Ihrem spezifischen menschlichen Proben-System. Für ELISA sollten Sie in Erwägung ziehen, mit dem Phosphopeptid zu beschichten und mit bekannten JAK2-aktivierten Zelllysaten zu validieren.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen und lagern Sie wie empfohlen (Versand im Eisbeutel), um die Antikörperaktivität zu erhalten.

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