Phospho-IRS1-S636/639 Kaninchen pAb für WB, ELISA – P35568

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IRS1

• Insulinrezeptor-Substrat 1 (IRS1, auch bekannt als HIRS-1) ist ein zentrales Signaladapterprotein, das die Signaltransduktion vom Insulinrezeptor (INSR) und Insulin-ähnlichen Wachstumsfaktor-I-Rezeptor (IGF1R) vermittelt. Es spielt eine entscheidende Rolle bei Entwicklung, Wachstum, Glukosehomöostase und Lipidstoffwechsel. Verwandte Referenzen: PMID:7541045, PMID:33991522, PMID:38625937, PMID:19639489
• Nach der Phosphorylierung durch aktivierte Rezeptoren dient IRS1 als Gerüst, das SH2-Domänen enthaltende Proteine wie die p85-Regulatoruntereinheit von PI3K, GRB2, NCK1/2 und SHP2 rekrutiert und so nachgeschaltete Signalkaskaden weiterverbreitet. Verwandte Referenzen: PMID:11171109, PMID:8265614
• Die Rekrutierung von GRB2 führt zur Aktivierung des Ras/Raf/MEK/MAPK-Signalwegs, der zusammen mit dem PI3K/AKT-Signalweg die Genexpression, Zellwachstum und Differenzierung reguliert.
• IRS1 reguliert den Wnt/beta-Catenin-Signalweg positiv, indem es den autophagievermittelten Abbau von DVL2 hemmt, und fördert dadurch die Zellproliferation. Verwandte Referenzen: PMID:24616100
• Das Protein kommt sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern vor, was mit seinen Rollen bei der Signaltransduktion und Transkriptionsregulation übereinstimmt.
• IRS1 wird an zahlreichen Serin/Threonin- und Tyrosinresten umfassend phosphoryliert; seine Dysregulation ist mit Insulinresistenz und Diabetes mellitus verbunden (Schlüsselwort: Diabetes mellitus, Phosphoprotein).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper erkennt spezifisch an Ser636 und Ser639 phosphoryliertes IRS1; sorgen Sie dafür, dass Proben vor der Detektion entsprechend stimuliert werden (z. B. mit Insulin), um die Phosphorylierung zu induzieren.
• Verwenden Sie für Western Blotting nach Möglichkeit phosphospezifische Lysepuffer und fügen Sie Phosphataseinhibitoren hinzu, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten.
• Überprüfen Sie die Antikörperspezifität durch den Vergleich von Signalen in phosphatasebehandelten und unbehandelten Proben oder durch Peptidblockierung mit dem nicht-phosphorylierten Immunogen.
• Das vorausgesagte Molekulargewicht von IRS1 beträgt 132 kDa; verwenden Sie einen passenden Gelprozentsatz und eine Transfermembran, die für hochmolekulare Proteine optimiert ist.
• Dieser Antikörper ist für WB und ELISA validiert; andere Anwendungen erfordern möglicherweise weitere Optimierung.

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