Phospho-IRS1-S307 (Menschenspezifisch) Kaninchen pAb für WB, IHC-P, ELISA – P35568

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Insulinrezeptor-Substrats 1

• Das Insulinrezeptor-Substrat 1 (IRS1) ist ein entscheidendes Signalanpassungsprotein, das Signale vom Insulinrezeptor (INSR) und dem Insulin-ähnlichen Wachstumsfaktor-1-Rezeptor (IGF1R) an nachgeschaltete Signalwege weitergibt und eine Schlüsselrolle bei der Glukosehomöostase und dem Wachstum spielt (PubMed:7541045, 33991522, 38625937). Zugehörige Referenzen: PMID:7541045 PMID:33991522 PMID:38625937

• Nach der Phosphorylierung wirkt IRS1 als Docking-Gerüst für SH2-Domänen enthaltende Proteine wie die p85-Untereinheit von PI3K, GRB2 und SHP2 und initiiert dadurch die PI3K/AKT- und Ras/MAPK-Signalkaskaden (PubMed:11171109, 8265614). Zugehörige Referenzen: PMID:11171109 PMID:8265614

• IRS1 moduliert den Wnt/β-Catenin-Signalweg positiv, indem es die autophagievermittelte Degradation von DVL2 verhindert, was die Zellproliferation fördert (PubMed:24616100). Zugehörige Referenzen: PMID:24616100

• Der PI3K/AKT-Zweig der IRS1-Signalgebung ist zentral für die metabolischen Wirkungen von Insulin, einschließlich der Glukoseaufnahme und Glykogensynthese, während der Ras/MAPK-Zweig die Genexpression und das Zellwachstum reguliert.

• IRS1 ist überwiegend im Zytoplasma lokalisiert, kann aber auch im Kern nachgewiesen werden, wo es mit Kernproteinen assoziieren kann, um die Transkription zu beeinflussen.

• Als hochreguliertes Phosphoprotein wird IRS1 an mehreren Stellen Serin/Threonin-phosphoryliert; es wird angenommen, dass die Phosphorylierung an S307 beim Menschen die Dauer und Sensitivität des Insulinsignals moduliert.

• Eine abweichende IRS1-Funktion wird mit Insulinresistenz, Typ-2-Diabetes und verwandten metabolischen Störungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Da der Antikörper die Phosphorylierungsstelle S307 targetiert, ist die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung entscheidend, um die Phosphosignale zu erhalten.
• Für Western Blot sollten Sie die Antikörperverdünnung optimieren und die Spezifität mit Blockierung durch nicht phosphoryliertes Peptid oder mit Phosphatase behandelten Lysaten überprüfen.
• Bei IHC-P kann die standardmäßige hitzeinduzierte Antigen-Demaskierung angewendet werden; validieren Sie die Färbemuster in positiven und negativen Gewebekontrollen.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-IRS1 ist aufgrund der hohen Sequenzhomologie im Bereich von S307 zu erwarten, bestätigen Sie aber die Spezifität in Ihrem Modellsystem.
• Für ELISA-Anwendungen stellen Sie sicher, dass das beschichtete Antigen das phosphorylierte Epitop enthält, und erwägen Sie ein Capture/Detection-Format.

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